Отбор проб для анализа при инфекционных заболеваниях. Для микробиологического исследования может быть отобрана любая ткань или физиологическая жидкость организма.

Выделение чистой культуры способствует увеличению количества бактерий и их точной идентификации. Для этого используют питательные среды. Если в образце присутствует нормальная микрофлора, то применяют избирательные (селективные) среды, позволяющие создать условия, неблагоприятные для роста непатогенных микроорганизмов и способствующие росту патогенной микрофлоры.

Для получения точных результатов следует выбрать оптимальный метод отбора проб и подойти к этому процессу с должной аккуратностью. При несоблюдении правил асептики контаминация проб крови микроорганизмами извне может привести к назначению неправильного лечения.

Большинство бактерий не способны существовать вне организма хозяина: облигатные анаэробы погибают под действием кислорода воздуха, а некоторые возбудители очень чувствительны к высыханию (Neisseria gonorrhoeae). Именно поэтому анализируемые образцы сразу после отбора должны быть помещены на подходящие среды или посеяны на среды для транспортировки.

Лабораторные методы исследования при инфекционных заболеваниях

Образцы могут быть проанализированы невооружённым глазом (например, для определения взрослых гельминтов в фекалиях или крови в мокроте). Микроскопия - быстрый и недорогой метод исследования, но требует высокого технического мастерства, характеризуется низкой чувствительностью: для точного определения необходимо присутствие большого количества возбудителей.

Кроме того, очень часто условно-патогенные микроорганизмы принимают за патогенные, что связано с недостаточной специфичностью метода.

В основе иммунофлюоресцентного метода лежит применение специфических антител, помеченных флюоресцентными маркёрами. Микроскопию осуществляют в ультрафиолетовом свете, при этом возбудитель и связанные с ним антитела светятся ярко-зелёным цветом.

Выделение чистой культуры возбудителя при инфекционных заболеваниях

Иногда, даже при выраженных клинических симптомах , возбудитель может присутствовать в очаге инфекции в количестве, недостаточном для микроскопического определения. В этом случае выделение чистой культуры позволяет увеличить численность микроорганизмов в исследуемом субстрате.

Существует два способа выращивания микроорганизмов : на жидких (увеличивается количество возбудителей) и твёрдых (исследуют отдельные колонии, в том числе и на чувствительность к антибиотикам) питательных средах. Большинство возбудителей инфекций человека достаточно требовательны к условиям культивирования. Именно поэтому питательные среды для их выращивания должны содержать белки, сахарозу и нуклеиновые кислоты (присутствующие в крови и сыворотке).

Кроме того, необходимо поддерживать соответствующий газовый состав : для культивирования анаэробов необходимо отсутствие кислорода, в то время как для облигатных аэробов (Bordetella pertussis) - наоборот. Оптимальная температура выращивания большинства патогенных микроорганизмов составляет 37 °С; культивирование некоторых фибов осуществляют при 30 С.

Идентификация возбудителя инфекционного заболевания

Симптомы заболеваний зависят от вида возбудителей, вызвавших их. Именно поэтому идентификация микроорганизма позволяет предположить клиническую картину вызываемого им заболевания (например, симптомы инфекции, вызванной Vibrio cholerae, отличны от таковых при заражении Shigella sonnei). Большое значение имеет выделение Neisseria meningitidis именно из спинномозговой жидкости. Идентификация микроорганизмов основана на:
изучении морфологических свойств их колоний в агаре;
различной окраске по Граму;
способности возбудителей к образованию спор;
изучении биохимических свойств (каталазный или коагулазный тесты).

Точное определение штамма обычно зависит от результатов биохимического анализа (например, уреазный тест) или обнаружения продуктов жизнедеятельности бактерий (индол). Возбудителей, которые не могут быть выращены на питательных средах, идентифицируют при помощи молекулярно-генетического метода ДНК и секвенирования (например, Trophyrema whippelii).

Определение чувствительности возбудителя инфекционного заболевания к антибиотикам

Если для эрадикации достаточно стандартной дозы антимикробного препарата, то их считают чувствительными, если необходимо увеличение дозы лекарственного средства - относительно устойчивыми. Абсолютно устойчивыми (резистентными) называют возбудителей, в отношении которых антибиотикотерапия неэффективна. Существует широкий спектр различных методов определения чувствительности к антимикробным препаратам.

Методы Британской ассоциации антимикробной химиотерапии (British Society of Antimicrobial Chemotherapy - BSAQ и Института клинических лабораторных стандартов (Clinical Laboratory Standards Institute - С LSI) основаны на определении диаметра зоны слабого роста микроорганизмов на твёрдой питательной среде при применении антимикробного препарата.

Минимальную подавляющую концентрацию антибиотика измеряют с помощью Е-теста, растворения препарата в питательном бульоне или нанесения его на плотный агар. В последнем случае на засеянный исследуемыми микроорганизмами агар наносят бумажные диски, пропитанные различными антибиотиками (метод бумажных дисков).

Уровень чувствительности зависит от диаметра зоны пониженного роста бактерий. Однако тестирование in vitro предоставляет лишь приблизительные данные, так как в клинической практике многое зависит от состояния больного.

Серологический анализ при инфекционном заболевании

Различные виды инфекций можно идентифицировать с помощью определения иммунного ответа, возникающего при внедрении возбудителя. Для этого существует большое количество различных методов: реакция агглютинации (РА), реакция связывания комплемента (РСК), реакция нейтрализации (РН) и иммуноферментный анализ (ИФА). Диагноз устанавливают на основании:
определения уровня антител (IgM) в ответ на попадание в организм чужеродного белка (антигена);
определения антигена.

Молекулярный анализ при инфекционном заболевании

Южный блоттинг и метод гибридизации нуклеиновых кислот . Методы основаны на связывании меченой ДНК с анализируемым образцом, при условии, что он имеет определённую последовательность аминокислот. Связанный комплекс определяют по активности метки. Это достаточно быстрый и надёжный способ, который, тем не менее, уступает по чувствительности молекулярно-генетическим методам.

Метод молекулярно-генетический (NAAT)

Для диагностики инфекционных заболеваний используют несколько молекулярно-генетических методов. Механизм выделения патогенной ДНК или РНК в количестве, достаточном для постановки диагноза, для каждого метода индивидуален. Так, при молекулярно-генетическом методе ДНК возбудителя разделяют на отдельные цепи, затем синтезируют праймеры для связывания с целевыми последовательностями. Образование новой ДНК катализирует полимераза.

Основное преимущество - достижение результата даже при наличии всего лишь одной копии ДНК. Благодаря автоматизированным системам и большому выбору специальных наборов эти методы стали доступны большинству диагностических лабораторий. Новые аппараты способны выдавать результат в режиме реального времени. Генетические методы позволяют идентифицировать микроорганизмы, выращивание которых отличается сложностью или сопряжено с риском для человека (например, Mycobacterium tuberculosis и Chlamydia trachomatis).

Отправить свою хорошую работу в базу знаний просто. Используйте форму, расположенную ниже

Студенты, аспиранты, молодые ученые, использующие базу знаний в своей учебе и работе, будут вам очень благодарны.

Размещено на http://www.allbest.ru/

Основные лабораторные исследования при болезнях печени

Выполнила:

Илиясова Г.

Введение

Существенное значение при заболеваниях печени имеют лабораторные исследования мочи, кала, асцитической жидкости и крови.

Анализ мочи

Цвет мочи при желтухе с выделением желчных пигментов почками становится насыщенно желтым, а при большом содержании желчных пигментов моча по виду напоминает темное пиво.

Желчные пигменты. Как постоянный признак, билирубинурия наблюдается при механической желтухе. При паренхиматозной желтухе билирубин появляется в моче не всегда, при гемолитической же желтухе он в моче отсутствует. По-видимому это, помимо количественных отношений, объясняется еще и тем, что билирубин, содержащийся в крови при гемолитической желтухе, несколько иного строения, чем при механической.

Желчные кислоты появляются в моче главным образом при механической желтухе, когда затруднено выделение их из желчных путей в кишечник. При паренхиматозной желтухе желчные кислоты в моче также могут иногда встречаться. При гемолитической желтухе их в моче не бывает. Большого значения определение желчных кислот не имеет.

Уробилин. Повышение содержания уробилина в моче (уробилинурия) указывает на неспособность печени переработать в билирубин весь поступающий в нее из кишечника уробилин либо ввиду увеличенного его поступления (при усиленном гемолизе), либо - чаще всего - при поражении функции печеночных клеток. Поэтому, если исключить случаи с усиленным гемолизом (гемолитическая желтуха, пернициозная анемия), уробилинурия может служить одним из характернейших признаков поражения печеночной паренхимы. Она встречается при многих заболеваниях печени - гепатитах, циррозах, застойной печени, при острых инфекциях (вследствие поражения печени) и т. п. Так как уробилин образуется из билирубина в кишечнике, то наличие механической желтухи с полным прекращением оттока желчи в двенадцатиперстную кишку препятствует появлению уробилинурии даже и при расстройстве функции печени.

Аминокислоты, особенно лейцин и тирозин, появляются в моче при тяжелом поражении печеночной паренхимы с нарушением образования мочевины из продуктов распада белка. Возможно, что тут играет роль и распад белков самой печени. Поэтому лейцин и тирозин наблюдаются в моче при тяжелых гепатитах и особенно при так называемой острой желтой атрофии печени.

Количество аммиака в моче может возрастать по той же причине - вследствие уменьшения образования мочевины при тяжелых диффузных поражениях печени. Но оно дает мало данных для суждения о функции печени, так как аммиак образуется и в почках, количество его в моче увеличивается и при изменении щелочно-кислотного равновесия в сторону ацидоза.

Ацетон может появляться в моче при тяжелых поражениях печени, но диагностического значения ацетонурия при заболеваниях печени не имеет.

Исследование кала

Окраска кала. При уменьшении выделения в кишечник билирубина (вследствие поражения печени или механического препятствия для оттока желчи) окраска кала бледнеет. При полном прекращении доступа желчи в кишечник кал совершенно обесцвечивается и напоминает по виду глину (ахолический стул). При повышенном выделении желчных пигментов в кишечник (плейохромия желчи) цвет кала темнеет.

Полное отсутствие стеркобилина в стуле определяется более точно химическим путем, так как, с одной стороны, небольшие количества стеркобилина могут не окрашивать кала, с другой - некоторые пищевые продукты могут придавать окраску калу, несмотря на отсутствие стеркобилина.

Количественное определение стеркобилина в кале дает более точные данные о ходе желчного обмена, но существенного практического значения не имеет.

Наличие жирных кислот и нейтральных жиров при микроскопическом исследовании кала указывает на отсутствие эмульгирующего жиры действия желчных кислот и наблюдается одновременно с обесцвечиванием стула при непоступлении желчи в кишечник.

анализ лабораторное исследование болезнь печень

Исследование асцитической жидкости

Исследование асцитической жидкости, полученной при пробном проколе, имеет значение для дифференциальной диагностики между асцитом и экссудативным перитонитом. Удельный вес ниже 1015, содержание белка не больше 3% и нахождение в осадке главным образом эндотелиальных клеток указывают на наличие транссудата, а не экссудата.

Исследование крови

При более детальном исследовании печеночного больного имеют известное значение некоторые способы исследования крови.

Количество билирубина в крови (билирубинемия)

Билирубин. Билирубин является основным желчным пигментом и образуется при разрушении гемоглобина. В крови билирубин связывается с альбуминами. В гепатоцитах происходит конъюгация билирубина с глюкуроновой кислотой, и в конъюгированном виде он выделяется с желчью. Повышение количества билирубина в крови (гипербилирубинемия) развивается в результате повышенной выработки билирубина, снижения интенсивности его захвата и/или конъюгации в печени и уменьшения экскреции желчи. Нарушение синтеза билирубина, его захвата гепатоцитами и/или конъюгации приводит к повышению уровня его Свободной (непрямой) Фракции в крови. Угнетение экскреции Прямого (связанного) Билирубина приводит к повышению его уровня в сыворотке крови и появлению билирубина в моче (билирубинурия не отмечается при изолированном повышении свободной фракции билирубина и, таким образом, может рассматриваться в качестве маркера прямой билирубинемии).Билирубинурия является ранним признаком поражения печени и желчных путей, и при остром вирусном гепатите (ОВГ) может отмечаться до развития Желтухи. Это имеет значение для практической наркологии, так как в ряде случаев больные наркоманией поступают в клинику для лечения основного заболевания в острой фазе вирусного гепатита со скрытым (субклиническим) течением. Диагностика ОВГ осложняется тем, что болезнь нередко протекает в безжелтушной форме, а клинические симптомы гепатита (например, общая слабость) могут маскироваться общей тяжестью абстинентного состояния и побочными действиями лекарственных средств, применяемых для его купирования.

Ферменты печени. Для лабораторной диагностики гепатобили-арных заболеваний имеют значение данные об уровне содержания в крови больных таких ферментов, как трансаминазы (аминотрансфе-разы), щелочная фосфатаза и гамма-глутамилтранспептидаза.

Аспартаттрансаминаза (ACT) Присутствует во многих паренхиматозных органах (печень, миокард, мозг, почки, скелетная мускулатура), поэтому повышение ее сывороточной активности является недостаточно специфичным диагностическим признаком. Несмотря на неспецифичность, значительное повышение уровня ACT в крови (более 500 МЕ/л) указывает на развитие острого вирусного или токсического гепатита (при исключении диагноза острого инфаркта миокарда).Степень повышения ACT не коррелирует с тяжестью патологического процесса и не имеет прогностического значения. Нормализация сывороточного уровня ACT при повторном исследовании обычно указывает на выздоровление и может рассматриваться в качестве критерия эффективности проводимой терапии.

Аланинтрансаминаза (АЛТ) Содержится преимущественно в гепатоцитах, поэтому повышение ее сывороточного содержания является более специфичным признаком гепатобилиарного поражения, чем возрастание ACT. Обычно при поражении печени ACT в сыворотке возрастает меньше, чем АЛТ (ACT/АЛТ < 1). Исключением является острый алкогольный гепатит, при котором это соотношение меняется (ACT/АЛТ > 2).Данное обстоятельство принято объяснять повышенной потребностью в пиридоксаль-5"-фосфате как кофакторе АЛТ (для больных алкоголизмом характерен дефицит пиридоксаль-5"-фосфата, лимитирующий выработку АЛТ). Весьма характерным признаком алкогольного поражения печени является соотношение ACT/ АЛТ > 3 при значительном увеличении сывороточного уровня ГГТ (в два раза превышающем подъем ЩФ).

Щелочная фосфатаза (ЩФ). Правильнее говорить о щелочных фосфатазах как группе изоферментов. Они участвуют в реакциях гидролиза эфирных связей органических фосфатов с образованием органического радикала и неорганического фосфата. ЩФ поступают в сыворотку крови из печени, костной ткани, кишечника и плаценты.Сывороточный уровень ферментов существенно повышается при нарушении желчеобразования и поэтому рассматривается как один из лабораторных маркеров холестаза, причем показатель возрастает приблизительно вчетверо вне зависимости от формы холестаза (внутрипеченочной или внепеченочной). В меньшей степени содержание ферментов в крови увеличивается при гепа-тоцеллюлярном поражении. Значительное повышение уровня ЩФ в крови отмечается при первичном билиарном циррозе, первичном склерозирующем холанги-те, подпеченочной желтухе, лекарственном гепатите с холестатичес- ким синдромом, холестатическом варианте острого алкогольного гепатита. Повышение сывороточной активности ЩФ при заболеваниях печени объясняется повышенным синтезом ферментов в гепатоцитах, зависящим от блока кишечно-печеночной циркуляции желчных кислот, и задержкой его поступления в желчь.Изолированное повышение ЩФ отмечается при гепатоцеллюляр-ной карциноме (ГЦК), метастатическом раке печени, амилоидозе, саркоидозе, лимфоме Ходжкина. Считается, что изолированное повышение ЩФ, особенно в пожилом возрасте, без других лабораторных или клинических симптомов, не является тревожным признаком и не представляет показаний для более углубленного обследования. Как правило, этот лабораторный феномен обусловлен повышением костной фракции фермента.

Гамма-глутамилтранспептидаза (ГГТ). Повышение сывороточного уровня ГГТ отмечается при различных заболеваниях печени и желчных путей, а также при обтурации общего желчного протока.Считается, что преимущественное повышение (по сравнению с трансаминазами) этого фермента при гепатитах указывает на токсическую природу заболевания. Возрастание ГГТ у наркологических больных является высокочувствительным, но вследствие этого неспецифичным маркером любого токсического (в том числе лекарственного) воздействия на гепатоциты. Повышение ГГТ в крови больных алкоголизмом и наркоманией (в сравнении с предшествующими показателями) при отсутствии медикаментозной терапии может быть косвенным признаком возобновления приема алкоголя, неалкогольных ПАВ или несанкционированного врачом приема психотропных препаратов в постабстинентный период и в ремиссии болезни.

Белки крови. Важным лабораторным показателем поражения печени является содержание Альбуминов плазмы. В наркологической практике нередко выявляется снижение уровня альбуминов, развивающееся вследствие угнетения синтетической функции печени при гепатоцеллюлярных поражениях, а также алиментарных нарушений, характерных для больных алкоголизмом.

Протромбиновый индекс (ПТИ). Отражает протромбиновую активность крови и определяется по формуле: где А - протромбиновое время крови здорового человека, В - протромбиновое время исследуемой крови. Протромбиновое время - это время образования сгустка в плазме при избытке тромбопластина и оптимальном содержании кальция. Протромбиновое время отражает активность факторов протромбино-вого комплекса, синтезируемых в печени.

Иммунологические исследования. Для лабораторной диагностики в гепатологии имеет значение исследование маркеров вирусных гепатитов (в том числе иммуноглобулинов).

Иммуноглобулины. Иммуноглобулины представляют собой сывороточные белки (преимущественного у-глобулины) и разделяются на 5 классов: IgA, IgM, IgG, IgD и IgE. Отдельные классы иммуноглобулинов имеют разное происхождение и биологическое значение, и их соотношение изменяется при различных заболеваниях. При поражении печени обычно отмечается повышение уровня всех классов иммуноглобулинов с некоторыми различиями, которые имеют дифференциально-диагностическое значение. Так, для первичного билиарного цирроза характерно преимущественное повышение IgM при умеренном повышении фракций других классов. Относительно специфичным маркером алкогольного поражения печени является повышение IgA. Напротив, снижение IgA характерно для длительно протекающего лекарственного поражения печени холестатического типа. При хроническом активном гепатите (ХАГ), как правило, отмечается повышение IgG и в меньшей степени - IgM.

Маркеры вирусных гепатитов. Выделяют следующие маркеры вирусных гепатитов: антигены (в роли которых выступают структурные и неструктурные белки вирусных частиц), нуклеиновые кислоты и антитела, вырабатывающиеся при поступлении антигенов в кровь больных.

Иммуноферментный анализ (ИФА). Метод основан на определении комплекса антиген-антитело путем введения ферментативной метки в один из реагентов и имеет значение для диагностики вирусных гепатитов.

Радиоиммунный анализ (РИА) Также основан на определении комплекса антиген-антитело, но при этом с компонентом реакции соединяется не ферментативная, а радиоактивная метка.Метод обладает высокой чувствительностью и также используется в диагностике вирусных гепатитов.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Метод диагностики вирусных гепатитов, основанный на выявлении нуклеиновых кислот (РНК и ДНК) вирусов гепатитов. В основе метода лежит процесс, идентичный естественной репликации нуклеиновой кислоты вируса. В ходе ПЦР последовательно происходит денатурация искомой нуклеиновой кислоты, ее обратная транскрипция (РНК --> ДНК или противоположная реакция) и амплификация (от англ.Amplification - увеличение, усиление) или синтез цепи, что практически соответствует природной репликации вирусов. ПЦР отличается высокой чувствительностью и специфичностью в обнаружении компонентов вирусов и позволяет судить о наличии активной вирусной инфекции (в отличие от серологических методов, позволяющих лишь констатировать перенесенную или текущую инфекцию).

Биохимические синдромы. Для диагностики поражения печени имеет значение констатация так называемых биохимических (лабораторных) синдромов:

цитолитического

холестатического

печеночно-клеточной недостаточности.

Цитолитический синдром. Свидетельствует о нарушении целостности клеточных мембран гепатоцитов и поступлении фрагментов мембран, клеточных органелл и компонентов цитозоля в межклеточный матрикс и кровь больных. Цитолитический синдром проявляется гипербилирубинемией и повышением сывороточной активности ACT и АЛТ в сыворотке крови и отражает массивность некроза гепатоцитов. Цитолитический синдром отмечается при острых гепатитах (в том числе вирусной, алкогольной и лекарственной природы), при обострении хронического гепатита и декомпенсации цирроза печени.

Холестатический синдром Как лабораторный феномен соответствует клиническому синдрому холестаза. Холестатический синдром проявляется гипербилирубинемией (не всегда), повышением сывороточной активности ЩФ и ГГТ, увеличением уровня холестерина в крови при исчезновении уробилина в моче. В наркологической клинике холестатический биохимический синдром выявляется при алкогольном поражении печени, острых и хронических вирусных гепатитах, а также лекарственном и токсическом поражении печени. Выраженность синдрома определяет тяжесть и длительность течения внутри - и внепеченочного холестаза.

Синдром печеночно-клеточной недостаточности Представляет совокупность лабораторных показателей, отражающих нарушение синтетической, метаболической и антитоксической функций гепатоцитов.

Синдром проявляется гипопротеинемией (в первую очередь гипоальбуминемией), дефицитом протромбина и факторов свертывания крови II, V и VII с уменьшением ПТИ, снижением клиренса лекарственных средств и их метаболитов, а также продуктов биогенных реакций (аммиака, фенолов, аминокислот) с повышением их содержания в крови.

Количество холестерина в крови не имеет особого диагностического значения, обычно несколько повышено при механической желтухе и желчнокаменной болезни.

Определение резистентности эритроцитов имеет известное значение при диагностике заболеваний печени, так как она нормальна или повышена при механической желтухе и понижена при гемолитической.

Размещено на Allbest.ru

Подобные документы

Специальные методы исследования крови и мочи животных. Условия взятия крови и мочи, сохранность до начала лабораторных исследований. Скорость оседания эритроцитов и содержания гемоглобина. Определение времени свертываемости крови по способу Бюркера.

курсовая работа , добавлен 31.03.2011


Определение глюкозы в крови на анализаторе глюкозы ECO TWENTY. Определение креатинина, мочевины, билирубина в крови на биохимическом анализаторе ROKI. Исследование изменения биохимических показателей крови при беременности. Оценка полученных данных.

отчет по практике , добавлен 10.02.2011


Общие функции крови: транспортная, гомеостатическая и регуляторная. Общее количество крови по отношению к массе тела у новорожденных и взрослых людей. Понятие гематокрита; физико-химические свойства крови. Белковые фракции плазмы крови и их значение.

презентация , добавлен 08.01.2014


Функции крови: транспортная, защитная, регуляторная и модуляторная. Основные константы крови человека. Определение скорости оседания и осмотической резистентности эритроцитов. Роль составляющих плазмы. Функциональная система поддержания рН крови.

презентация , добавлен 15.02.2014


Место крови в системе внутренней среды организма. Количество и функции крови. Гемокоагуляция: определение, факторы свёртывания, стадии. Группы крови и резус–фактор. Форменные элементы крови: эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, их количество в норме.

презентация , добавлен 13.09.2015


Эпидемиология, этиология и патогенез острого и хронического пиелонефрита. Изменения биохимических показателей крови, показателей азотистого и белкового обмена. Морфологическое исследование элементов осадка мочи. Определение креатинина в сыворотке крови.

курсовая работа , добавлен 03.11.2015


Хронический и острый панкреатит. Активность амилазы, липазы, трипсина. Глюкоза крови при остром и хроническом панкреатитах. Маркеры печеночной недостаточности. Определение активности альфа-амилазы, билирубина в сыворотке крови, гаммаглутаминтрансферазы.

курсовая работа , добавлен 01.12.2014


Общая характеристика и функциональные особенности разнообразных клеток крови: эритроциты, гемоглобин, лейкоциты. Основные факторы, влияющие на количество эритроцитов, состояния, связанные с их избытком и недостатком. Гемолиз: принципы и этапы протекания.

презентация , добавлен 26.01.2014


Лабораторное исследование периферической крови у детей. Функции эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов. Качественные изменения нейтрофилов. Скорость оседания эритроцитов. Белковый состав плазмы крови. Нормальные показатели у детей различного возраста.

презентация , добавлен 22.09.2016


Исследование крови как один из важнейших диагностических методов, общая методика и этапы его проведения, особенности и значение. Параметры оценки красной и белой крови, тромбоцитов, нейтрофилов и эритроцитов, документальное оформление результатов.

Наряду с применяемыми в офтальмологической практике инструментальными методами обследования, лабораторные исследования могут проводиться с целью повышения точности диагностики, выявления индивидуальных особенностей течения процесса, оценки его тяжести и возможных осложнений.

Ю.С. Краморенко, д.м.н., профессор,
КазНИИ глазных болезней, г. Алматы

Современные требования к ранней диагностике офтальмопатологии диктуют необходимость обоснования подходов к проведению того или иного вида лабораторных исследований, разработки диагностических программ (алгоритмов) с учетом международных требований при определении стандартов (протоколов) диагностики и лечения больных.

Лабораторные исследования - важная составляющая лечебно-диагностического процесса, дающая врачу-клиницисту всестороннюю информацию о состоянии здоровья пациента, что, в свою очередь, способствует постановке наиболее точного диагноза и контролю эффективности проводимого лечения. Изменения в периферической крови являются следствием многозвенных межсистемных процессов, отражающих патогенетические, компенсаторные, адаптивные сдвиги, сопутствующие развитию заболевания.

При обращении к глазному врачу районной или городской поликлиники пациенту, при необходимости, проводится первый этап лабораторного обследования, включающий общий анализ крови (ОАК) - широко распространенное исследование на уровне ПМСП при различных видах офтальмопатологии.

К задачам второго этапа лабораторного обследования относится проведение биохимических исследований, необходимых для постановки клинического диагноза и оценки степени тяжести заболевания, определения характера и объема лечебных мероприятий, контроля эффективности лечения, прогнозирования развития патологического процесса, а также для направления в хирургический стационар.

Клетки крови - это главные участники ранней ответной реакции на любые изменения в тканях, являясь чувствительным индикатором состояния организма. Общий анализ крови позволяет оценить насыщенность крови гемоглобином, который обеспечивает транспортировку кислорода в крови, определить относительное (в процентах) и абсолютное количество клеток крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, эозинофилов и других), скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Биохимический анализ крови является неотъемлемым методом лабораторной диагностики нарушения обменных процессов при различных заболеваниях.

Углеводный обмен отражает уровень глюкозы крови - весьма доступный, но нестабильный показатель, зависящий от ряда причин, в том числе от эмоционального состояния пациента, в цельной крови он соответствует - 3,05-6,3 ммоль/л.

Более значимым, как показатель риска в диагностике развития глазных осложнений сахарного диабета, является определение гликозилированного гемоглобина (HbA1C) крови, уровень которого отражает концентрацию глюкозы как натощак, так и после еды, в норме он составляет 4-6% от общего количества гемоглобина и соответствует нормальному содержанию сахара в 3-5 ммоль/л.

Рост доли гликозилированного гемоглобина на 1% связан с увеличением уровня глюкозы в плазме крови, в среднем, на 2 ммоль/л. Определение гликозилированного гемоглобина является одним из методов, способных нивелировать отрицательное влияние метаболических нарушений и отражает степень компенсации углеводного обмена в течение 3 месяцев. Это наиболее доступный маркер качества предоперационной подготовки для пациентов, страдающих сахарным диабетом. Результаты исследования гликозилированного гемоглобина показали, что у здоровых лиц его содержание в крови не зависит от пола и возраста.

Липидный обмен определяется такими показателями, как: холестерин ОХ - 5,2 ммоль/л, холестерин липопротеидов высокой плотности (ХС ЛПВП) - более 1,45, холестерин липопротеидов низкой плотности (ХС ЛПНП) - 3,37 ммоль/л, коэффициент атерогенности - до 3 единиц, триглицериды (ТГ) - 0,68-2,3 ммоль/л. У здоровых лиц эти показатели определяются в указанных пределах.

Традиционно липидный спектр включает определение общего холестерина и ХС в липопротеиновых комплексах. Определение показателей липидного обмена в минимальном объеме необходимо для постановки клинического диагноза при различной сосудистой патологии и оценки степени тяжести заболевания, так как дислипидемия является одним из пусковых механизмов повреждения сосудов. Повышение отношения ЛПНП к ЛПВП и индекса атерогенности (отношение ХС-ХС ЛПВП/ХС ЛПВП) рассматривается как достоверный фактор риска атерогенных тенденций в развитии сосудистой патологии. Повышение уровня холестерина в составе ЛПНП считается фактором риска развития сосудистых осложнений СД. Маркерами атерогенных липопротеидов и метаболического синдрома являются триглицериды - эфиры глицерина и жирных кислот (полиненасыщенных и мононенасыщенных), основной компонент липопротеидов очень низкой плотности (ЛПОНП). У больных с повышенной концентрацией триглицеридов выявляются выраженные сосудистые изменения. Установлено, что гипертриглицеридемия функционально связана с гипергликемией.

Белки крови выполняют многообразные функции, образуя комплексы с углеводами, липидами и другими субстанциями, связывают токсины, что можно рассматривать как важный механизм детоксикации организма.

Электрофорез белков является одним из наиболее информативных лабораторных тестов. Протеинограмма крови дает ценные сведения о состоянии белковой системы, реагирующей на метаболические изменения в организме под влиянием тех или иных воздействий. Изменение белковых фракций указывает на тяжесть, длительность и остроту поражения, эффективность проводимой терапии и на прогноз заболевания.

Особое место среди белков острой фазы воспаления занимает C-реактивный белок (СРБ), относящийся к бета-глобулинам, как биохимический маркер активности течения заболевания наиболее доступный для определения на любом уровне. СРБ, взаимодействуя с Т-лимфоцитами, фагоцитами и тромбоцитами, регулирует их функции при воспалении, стимулирует иммунные реакции.

С-реактивный белок появляется в крови уже через 4-6 часов от начала воспалительного процесса (до увеличения количества гранулоцитов) и достигает пика через 1-2 дня, при успешном выздоровлении его уровень быстро снижается. С переходом в хроническую фазу заболевания С-реактивный белок исчезает из крови и снова появляется при обострении процесса. По диагностической значимости сопоставим с СОЭ, но уровень С-реактивного белка растет и снижается быстрее.

Повышение уровня С-реактивного белка наблюдается при острых бактериальных и вирусных инфекциях, злокачественных новообразованиях и аутоиммунных заболеваниях, установлена прямая связь между уровнем СРБ и риском осложнений со стороны периферических сосудов.

После хирургических вмешательств в остром периоде уровень СРБ повышается, однако начинает быстро снижаться в отсутствие бактериальной инфекции, поэтому определение СРБ в послеоперационном периоде может применяться для контроля за опасностью возникновения такой инфекции. Поскольку уровень С-реактивного белка в течение суток может резко меняться, его следует определять в динамике. В сыворотке здорового человека СРБ отсутствует.

Клинико-лабораторные исследования при некоторых социально значимых заболеваниях глаз, связанных с нарушением обменных процессов, определили необходимость их проведения и мониторинга в процессе лечения и диспансерного наблюдения.

Диабетическая ретинопатия. Многообразие клинических проявлений сахарного диабета (СД) диктует необходимость лабораторного исследования с целью выявления особенностей метаболизма развития заболевания, характеризующегося нарушением углеводного, жирового, белкового и других видов обмена веществ, и определения наиболее информативных показателей, которые могут быть использованы в качестве диагностических и прогностических тестов, критериев оценки эффективности лечения.

Лабораторные исследования при ДР должны включать: определение уровня глюкозы и гликозилированного гемоглобина крови в динамике; исследование липидограммы (ХС, ХС ЛПВП, ХС ЛПНП, ТГ).

Динамическое определение уровня гликемии дает возможность судить об уровне метаболических нарушений, степени их коррекции. Уровень гликозилированного гемоглобина крови необходимо контролировать каждые 3 месяца.

Возрастная макулярная дегенерация (ВМД) - заболевание, которое развивается на фоне генерализованного нарушения церебральной гемодинамики, общей и местной сосудистой патологии, приводящей к ухудшению кровоснабжения и развитию трофических процессов в глазу. Дистрофические процессы в сетчатой оболочке глаза отражают нарушения обмена веществ во всем организме.

Исследование липидограммы - показало, что у больных ВМД пожилого возраста показатели липидного обмена крови отличались от физиологической нормы в среднем на 20-30%. Установлено повышение содержания общего холестерина ХС липопротеидов низкой плотности в 1,2 раза относительно показателей контрольной группы, тогда как уровень ХС липопротеидов высокой плотности был ниже в 1,7 раза по сравнению с величиной контроля, соответственно, значительно повышался индекс атерогенности - в 3,1 раза. Выраженность нарушений возрастала с увеличением длительности и степени тяжести заболевания. Выявлена прямая корреляционная связь между содержанием триглицеридов и количеством ОХ, обратная - между уровнем ЛПНП и ЛПВП.

Глаукома. Проводимое в КазНИИ глазных болезней комплексное клинико-лабораторное исследование метаболических и иммунологических факторов, играющих важную роль в патогенезе первичной глаукомы, выявило активацию процессов перекисного окисления липидов на фоне снижения антиоксидантной защиты, проявляющейся в дисбалансе в системе антиокислительных ферментов эритроцитов и лимфоцитов (каталазы, супероксиддисмутазы и глутаионредуктазы) и снижении уровня природных антиоксидантов в крови (уменьшение содержания витаминов А, Е, С, рибофлавина). Эти нарушения были одинаково выражены как при открытоугольной, так и при закрытоугольной формах глаукомы, но в наибольшей степени в период острого приступа.

У больных с выраженной глаукомой уровень холестерина выше нормы выявлен в 75% случаев, преимущественно за счет повышения уровня ХС ЛПНП, высокий уровень триглицеридов, а также уменьшение содержания альбуминов и увеличение - бета и гамма-глобулинов.

Таким образом, диагностика офтальмопатологии, основанная на клинико-лабораторных данных, направлена на проведение соответствующего лечения для улучшения его результатов. Динамическое исследование биохимических и гематологических показателей в процессе лечения дает возможность оценить его эффективность, так как отсутствие положительных сдвигов в уровне исследуемых показателей свидетельствует о недостаточном эффекте проводимого лечения, прогрессировании процесса. Комплекс клинико-лабораторных методов обследования офтальмологических больных расширяет возможности ранней диагностики, что позволяет определить схему лечения патогенетической направленности.

20 июня 2018
«Казахстанский фармацевтический вестник» №12 (542), июнь 2018 г.

8717 0

Лабораторное обследование больного ревматологического профиля имеет своей целью:
. определить или подтвердить характер патологического процесса — имеется воспаление, дегенеративно-дистрофические изменения, обменные нарушения, травма, опухоль;
. на основе клинических и лабораторных данных определиться врачу в наиболее вероятной нозологической диагностике;
. оценить остроту патологического процесса, его активность и определить наиболее пораженный орган или систему;
. ориентировать врача на выбор адекватного метода лечения в соответствии с предполагаемой нозологией, активностью процесса и характером поражения различных органов;
. оценить адекватность проводимого лечения в динамике, сориентироваться относительно прогноза;
. своевременно распознать возникающие осложнения основного заболевания и лекарственной терапии;
. диагностировать сопутствующие и конкурирующие заболевания.

Выбор врачом методов и объема лабораторных исследований ревматологического больного должен соответствовать основной диагностической гипотезе, базирующейся на анамнезе и данных объективного исследования, при этом учитываются пол, возраст, профессия пациента, провоцирующие факторы. Лабораторные исследования как объективные критерии могут подтвердить предполагаемый диагноз или отвергнуть его, а во многих случаях быть определяющими в постановке окончательного диагноза. Очень важно выполнение необходимых исследований в динамике, особенно с учетом клиники болезни, результатов инструментального и других исследований.

В диагностике ревматологических заболеваний используются общеклинические исследования крови и мочи, биохимические, серологические и иммунологические исследования крови, синовиальной жидкости, а также гистоморфологическое исследование биоптатов пораженных органов. Каждый из них несет определенный объем информации, что помогает в установлении окончательного диагноза.

В современных условиях особую ценность представляет иммунологическое исследование, позволяющее более глубоко вникнуть в характер патологических изменений. К сожалению, доступность этих методов ограничена из-за их высокой стоимости, да и получаемая информация не всегда дает однозначный ответ. Это потому, что иммунологические тесты могут иногда выходить за рамки «нормальных» показателей как у здоровых, так и у страдающих неревматической патологией, а обнаружение определенных антител в высоком титре при отсутствии клиники заболевания не является достаточным основанием для постановки аутоиммунного заболевания.

Надо учитывать и то, что количество антител возрастает у лиц пожилого возраста, у некоторых пациентов после приема лекарственных средств, при вирусных и бактериальных инфекциях, при новообразованиях, у родственников больных, страдающих аутоиммунным заболеванием. Иммунологические показатели должны оцениваться в комплексе с имеющейся клиникой и результатами других исследований, особенно в динамике наблюдения и лечения больного.

В проведении лабораторного обследования ревматологического больного существует определенная этапность, последовательность. Вначале выполняются общедоступные, скрининговые исследования: общий анализ крови, мочи, определяется СРВ, оцениваются белки крови, уровень грансаминаз. Это позволяет определиться в главном — имеется воспаление или другой процесс. При этом должно учитываться и то, что отклонения в результатах исследований могут быть обусловлены неревматологической патологией, а нормальные лабораторные показатели не исключают ни того, ни другого.

При неясности окончательного диагноза или с целью уточнения нозологической принадлежности, для оценки тяжести процесса, его динамики, прогноза используются другие лабораторные методы. Их количество огромное, многие из них сложны и дорогостоящи, поэтому выбор каждого из hpix должен быть хорошо обоснован. Необходимо подчеркнуть то, что многие из этих исследований не обладают строгой специфичностью и не могут использоваться как абсолютный тест нозологической диагностики, хотя некоторые из них могут четко указывать па это.

Общий анализ крови

Его значение в клиническом обследовании пациента трудно переоценить, выявляемые отклонения нередко определяют дальнейшую тактику врача.

В общем анализе крови у ревматологического больного возможны отклонения в показателях красной крови — развитие анемии различной степени выраженности. Чаще определяется нормохромная либо гипохромная нормоцитарная анемия. Ее генез может быть разным — нарушение всасывания железа в кишечнике, гемолиз эритроцитов и кровопотеря. Наличие анемии обычно указывает па тяжесть и неблагоприятное течение болезни, что нередко бывает при ревматоидном артрите, туберкулезе костей и суставов и др.

Железодефицитная анемия бывает обусловлена язвенным кровотечением из ЖКТ, развившимся от применения медикаментов (НПВП, стероидные гормоны). У женщин это возможно при обильных менструациях. Гемолитический характер анемии может быть обусловлен применением таких препаратов, как сульфасалазин, плактивил, делагил. Причиной анемии при лечении ревматоидного артрита и болезней соединительной ткани может оказаться применение солей золота, пеницилламина, иммунодепрессантов, подавляющих костномозговое кроветворение, иногда вплоть до аплазии. Причиной анемического синдрома может оказаться и другая, неревматологическая патология (болезни ЖКТ, полипоз, опухоль, заболевания крови и др.).

В общем анализе крови при ревматологических заболеваниях может определяться лейкоцитоз, он отражает остроту процесса. Возможен умеренный лейкоцитоз — до 12 х 10 9/л и выраженный — до 25 х 10 9/л. Умеренный лейкоцитоз выявляется при большинстве воспалительных ревматологических процессов. Резко выраженный лейкоцитоз характерен для септичеекгтх артритов, гонореи, системного васкулита, синдрома Стилла, болезни Кавасаки, острого приступа подагры. Выраженный лейкоцитоз может быть обусловлен и неревматической патологией — сепсис, пневмония, лейкоз, лейкемоидная реакция, нагноение. Умеренный лейкоцитоз возникает при применении ГКС.

Лейкопения (менее 4 х 109/л) определяется при тяжелых формах ревматоидного артрита (РА), при системной красной волчанке (СКВ), бруцеллезном артрите, смешанных заболеваниях соединительной ткани, при затяжном гонорейном артрите, от применения лекарственных средств.

Формула белой крови чаще не претерпевает больших изменений, хотя возможна нейтропения, а в остром периоде болезни возможен сдвиг в формуле влево. Эозинофилия наблюдается при аллергических артритах, при РА с системными проявлениями, при синдроме Шегрена, системной склеродермии, синдроме эозинофилии — миалгии, диффузном эозинофильном фасциите, синдроме Черджа—Стросса, при саркоидозе, аллергии на медикаменты. При хронических формах артритов, при бруцеллезе возможен лимфоцитоз.

Исследование периферической крови должно проводиться в процессе наблюдения за больным и его лечения. Нормализация показателей отражает положительную динамику болезни.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) — очень чувствительный маркер воспаления, высокоинформативный показатель остроты и активности процесса, важный дифференциально-диагностический критерий ряда ревматологических заболеваний.

Значительное увеличение СОЭ (до 70-80 мм/ч) наблюдается при РА, коллагенозах, что отражает активность воспаления при этих заболеваниях, по мере стихания клинических признаков СОЭ может некоторое время еще оставаться увеличенной, а затем нормализуется. Если нормализация не наступает — это признак активного процесса или нагноения. При ревматическом артрите нормализация СОЭ наступает лишь при полной ремиссии. Аналогичное наблюдается при инфекционных артритах. Небольшое увеличение СОЭ возможно при остеоартрозе, травме, сопровождающихся вторичным синовитом. Значительное увеличение СОЭ бывает при остром приступе подагры. Увеличение СОЭ более 40 мм/ч является важным тестом в подтверждении диагноза гигантоклеточного артериита и ревматической полимиалгии.

Кратковременное увеличение СОЭ отмечается при остром воспалении синовиальных сумок и влагалищ, при периартритах, миозитах. Лишь нагноение сумок, образование флегмоны дает резкое увеличение СОЭ.

Увеличенная СОЭ бывает у здоровых женщин во время беременности, при анемии любого генеза, при любом воспалении неревматического генеза, при онкологических заболеваниях, а в 3-11% случаев установить причину увеличенной СОЭ вообще не удается.

Сниженная СОЭ возможна при остром лейкозе, застойной сердечной недостаточности, при кахексии, полицитемии, гипофибриногенемии, при изменении свойств эритроцитов.

Определенную диагностическую ценность в распознавании ревматологических заболеваний имеет оценка количества тромбоцитов. Тромбоцитоз (более 300 х 109 г/л) нередко отражает степень воспалительной активности процесса, а в диагностике болезни Кавасаки он является важнейшим признаком. Тромбоцитопения возможна при системной красной волчанке, синдроме Шегрена, смешанном заболевании соединительной ткани, синдроме Фелти, при системном васкулите, а также быть следствием лекарственной терапии.

В общем анализе мочи при ревматологической патологии возможны некоторые отклонения, ценные для распознавания основного заболевания и его осложнений, а также осложнений лекарственной терапии. Протеинурия — почти постоянный спутник повышенной температуры тела, она исчезает при ее нормализации. Постоянная протеинурия характерна для СКВ, системной склеродермии, системных васкулитов. Высокое содержание белка в моче может указывать на развитие у больного нефротического синдрома при СКВ или амилоидозе. Протеинурия может быть обусловлена интерстициальным нефритом, быть следствием лечения НПВП, солями золота, пеницилламином.

Обнаружение в моче белка Бенс-Джонса может указывать на наличие системного заболевания или другой выраженной патологии (синдром Шегрена, амилоидоз, хронический лимфолейкоз, макроглобулинемия Вальденстрема, миеломная болезнь).

Существенное диагностическое значение в распознавании подагры имеет определение в моче содержания мочевой кислоты с помощью колориметрического метода. Верхней границей суточного выделения мочевой кислоты при трехдневной диете больного со сниженным содержанием пуринов является 600 мг (3,6 ммоль). При подагре ее количество в моче может быть значительно выше.

Исследование белков крови относится к очень чувствительным методам диагностики многих ревматологических заболеваний, особенно воспалительного характера. Оно представляет исключительную ценность в дифференциальной диагностике различных форм патологии, в оценке остроты процесса, динамики заболевания и эффективности проводимого лечения.

Исследование белков включает характеристику «белкового зеркала» (общее количество белка в крови, количество альбуминов, глобулинов, фракций глобулинов), определение содержания СРВ, фибриногена, иммуноглобулинов, наличие антител, комплемента, ЦИК, криоглобулинов и др.

Необходимо отметить то, что многие из этих тестов также не обладают строгой нозологической специфичностью, они лишь отражают наличие и характер воспаления, его динамику в процессе лечения, а также иммунологические реакции в ответ на агрессию. Лишь отдельные тесты могут указывать на определенную нозологию.

И.А. Реуцкий, В.Ф. Маринин, А.В. Глотов

Клинический анализ крови (общий анализ крови) — это лабораторное исследование, позволяющее оценить качественный и количественный состав крови. Данное исследование включает в себя определение следующих показателей:

• количество и качество эритроцитов,
• цветовой показатель,
• величина гематокрита,
• содержание гемоглобина,
• скорость оседания эритроцитов,
• количество тромбоцитов,
• количество лейкоцитов, а также процентное соотношение различных видов лейкоцитов в периферической крови.

Подробно о клиническом анализе крови можно прочитать в этой статье .

Пункционная диагностика

Морфологический состав крови не всегда отражает изменения, возникающие в кроветворных органах. Поэтому с целью верификации диагноза и количественной оценки функции костно-мозгового кроветворения у гематологических больных, а также с целью контроля за эффективностью лечения проводят морфологическое исследование костного мозга.

Для этого используют 2 метода:

1. Стернальная пункция — метод, предложенный в 1927 году М.И. Аринкиным, технически более прост, не требует присутствия хирурга и может выполняться в амбулаторных условиях.
2. Трепанобиопсия гребешка подвздошной кости — метод является более точным, поскольку получаемые срезы костного мозга полностью сохраняют архитектонику органа, позволяют оценить диффузный или очаговый характер изменений в нем, исследовать соотношение кроветворной и жировой тканей, выявить атипичные клетки.

Основными показаниями для исследования костного мозга являются алейкемические формы лейкозов, эритремия, миелофиброз и другие миелопролиферативные и лимфопролиферативные заболевания, гипо- и апластические анемии.

В настоящее время для детального анализа гемопоэза перспективным направлением в теоретическом и практическом плане является метод клонирования клеточных кроветворных популяций. Этот метод позволяет клонировать различные клеточные кроветворные популяции, прогнозировать течение заболевания, осуществлять контроль за эффективностью проводимой терапии.

Клональные методы широко используются при аутологичной и аллогенной трансплантации костного мозга человека для оценки качества донорского трансплантата и контроля за эффективностью его приживания у реципиента.

Исследование системы гемостаза

Система гемостаза представляет собой сложную многофакторную биологическую систему, основными функциями которой являются остановка кровотечения путем поддержания целостности кровеносных сосудов и достаточно быстрого их тромбирования при повреждениях и сохранение жидкого состояния крови.

Эти функции обеспечиваются следующими системами гемостаза:

• стенками кровеносных сосудов;
• форменными элементами крови;
• многочисленными плазменными системами, включающими свертывающую, противосвертывающую и другие.

При повреждении сосудов запускаются два основных механизма остановки кровотечения:

• первичный, или сосудисто-тромбоцитарный, гемостаз, обусловленный спазмом сосудов и их механической закупоркой агрегатами тромбоцитов с образованием "белого тромба";
• вторичный, или коагуляционный, гемостаз, протекающий с использованием многочисленных факторов свертывания крови и обеспечивающий плотную закупорку поврежденных сосудов фибриновым тромбом (красным кровяным сгустком).

Методы исследования сосудисто-тромбоцитарного гемостаза

Наиболее распространенными являются следующие показатели и методы их определения:

Резистентность капилляров. Из методов оценки ломкости капилляров чаще всего используется манжеточная проба Румпель — Лееде — Кончаловского. Через 5 минут после наложения манжеты для измерения АД на плечо и создания в ней давления, равного 100 мм рт. ст., ниже манжеты появляется определенное количество петехий. Нормой является образование в этой зоне менее 10 петехий. При повышении проницаемости сосудов или тромбоцитопении число петехий в этой зоне превышает 10 (положительная проба).

Время кровотечения. Данный тест основан на изучении длительности кровотечения из участка прокола кожи. Нормативные показатели длительности кровотечения при определении по методу Дьюке — не выше 4 минут. Увеличение длительности кровотечения наблюдается при тромбоцитопениях или/и тромбоцитопатиях.

Определение количества тромбоцитов. Число тромбоцитов у здорового человека в среднем составляет 250 тыс. (180—360 тыс.) в 1 мкл крови. В настоящее время для определения числа тромбоцитов существует несколько лабораторных технологий.

Ретракция сгустка крови. Для ее оценки чаще всего используют непрямой метод: измеряют объем сыворотки, выделяемой из сгустка крови при ее ретракции по отношению к объему плазмы в исследуемой крови. В норме показатель равен 40 — 95%. Его уменьшение наблюдается при тромбоцитопениях.

Определение ретенции (адгезивности) тромбоцитов. Чаще используется метод, основанный на подсчете числа тромбоцитов в венозной крови до и после ее пропускания с определенной скоростью через стандартную колонку со стеклянными шариками. У здоровых людей индекс ретенции составляет 20 — 55%. Уменьшение показателя наблюдается при нарушении адгезии тромбоцитов у больных с врожденными тромбоцитопатиями.

Определение агрегации тромбоцитов. Наиболее интегральную характеристику агрегационной способности тромбоцитов можно получить при спектрофотометрической или фотометрической количественной регистрации процесса агрегации с помощью агрегографа. В основе метода лежит графическая регистрация изменения оптической плотности тромбоцитарной плазмы при перемешивании ее со стимуляторами агрегации. В качестве стимуляторов можно использовать АДФ, коллаген, бычий фибриноген или ристомицин.

Коагуляционный гемостаз

Процесс свертывания крови принято условно разделять на две основные фазы:

1. фаза активации — многоступенчатый этап свертывания, который завершается активацией протромбина (фактор II) тромбокиназой c превращением его в активный фермент тромбин (фактор IIa);
2. фаза коагуляции — конечный этап свертывания, в результате которого под влиянием тромбина фибриноген (фактор I) превращается в фибрин.

Для исследования процессов гемокоагуляции используются следующие показатели:

• время свертывания крови,
• активированное время рекальцификации плазмы (норма с хлоридом кальция 60 — 120 с, с коалином 50 — 70 с),
• активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ ) (норма 35 — 50 с),
• протромбиновое время (ПТВ ) (норма: 12 — 18 с),
• тромбиновое время (норма 15 — 18 с),
• протромбиновый индекс (ПТИ ) (норма 90 — 100%),
• аутокоагуляционный тест,
• тромбоэластографию.

Преимуществом среди этих методов обладают три теста: ПТИ, АЧТВ и международное нормализованное отношение (МНО ), так как они позволяют судить не только о состоянии всей свертывающей системы крови, но и недостаточности отдельных факторов.

ПТИ (%) = Стандартное ПТВ / ПТВ у обследуемого пациента

МНО - показатель, который рассчитывается при определении ПТВ. Показатель МНО был введён в клиническую практику, чтобы стандартизировать результаты теста ПТВ, поскольку результаты ПТВ варьируют в зависимости от типа реагента (тромбопластина), используемого в разных лабораториях.

МНО = ПТВ пациента / ПТВ контрольной пробы

Определение МНО гарантирует возможность сравнения результатов при определении ПТВ, обеспечивая точный контроль терапии непрямыми антикоагулянтами. Рекомендуются два уровня интенсивности лечения непрямыми антикоагулянтами: менее интенсивный — показатель МНО равен 1,5 — 2,0 и более интенсивный — МНО равен 2,2 — 3,5.

При исследовании свертывающей системы крови важное значение имеет определение содержания фибриногена (норма 2 — 4 г/л). В патологии этот показатель может уменьшаться (ДВС-синдром, острый фибринолиз, тяжелое поражение печени) или увеличиваться (острые и хронические воспалительные заболевания, тромбозы и тромбоэмболии). Большое значение имеет также определение высокомолекулярных производных фибриногена, растворимых фибрин-мономерных комплексов, продуктов деградации фибрина.

В условиях физиологической нормы ограничение процессов плазмокоагуляции осуществляют антикоагулянты, которые подразделяются на две группы:

1. первичные, постоянно содержащиеся в крови — антитромбин III, гепарин, протеин С, α 2 -макроглобулин и др.;
2. вторичные, образующиеся в процессе свертывания и фибринолиза.

Среди этих факторов важнейшим является антитромбин III, на долю которого приходится 3/4 активности всех физиологических ингибиторов коагуляции. Дефицит этого фактора приводит к тяжелым тромботическим состояниям.

В крови даже при отсутствии повреждения сосудов постоянно происходит образование небольшого количества фибрина, расщепление и удаление которого осуществляет система фибринолиза. Основными методами исследования фибринолиза являются:

• исследование времени и степени лизиса сгустков крови или эуглобулиновой фракции плазмы (норма 3-5 ч, с коалином - 4-10 мин);
• определение концентрации плазминогена, его активаторов и ингибиторов;
• выявление растворимых фибринмономерных комплексов и продуктов деградации фибриногена/фибрина.

Дополнительные методы исследования крови и мочи

При некоторых гематологических заболеваниях в крови можно определить аномальные белки — парапротеины. Они относятся к группе иммуноглобулинов, но отличаются от них по своим свойствам.

При миеломной болезни на электрофореграмме определяется гомогенная и интенсивная полоса М в области γ-, β- или (реже) α 2 -глобулиновых фракций. При болезни Вальденстрема пик аномальных макроглобулинов располагается в области между β- и γ-глобулиновыми фракциями. Но наиболее информативным методом для раннего выявления аномальных парапротеинов является иммуноэлектрофорез. У 60% больных с миеломной болезнью в моче, особенно на ранних стадиях, можно выявить низкомолекулярный протеин — белок Бенс-Джонса.

Ряд гематологических заболеваний характеризуется изменением осмотической резистентности эритроцитов. Метод основан на количественном определении степени гемолиза в гипотонических растворах хлорида натрия различной концентрации: от 0,1 до 1%. Понижение осмотической резистентности встречается при микросфероцитарной и аутоиммунной гемолитических анемиях, а повышение — при механической желтухе и талассемии.