Анти-HCV - анализ на гепатит С, назначаемый врачом в процессе диагностики вирусной инфекции. Тест основан на особенностях ответа иммунной системы человека при попадании патогена внутрь клеток. При этом происходит выброс в кровь биологически активных веществ - иммуноглобулинов (в медицинской литературе обычно обозначаются сокращенно Ig).

Вырабатывающиеся антитела (АТ) специфичны, то есть их структура четко предопределена в зависимости от разновидности патогена. На этом и построен принцип серологического иммуноферментного исследования, которое получило название анализ ИФА анти-HCV.

Строение и содержание синтезирующихся иммуноглобулинов находится в прямой зависимости от структурных единиц вириона гепатита С. HCV (hepatitis C virus) представляет собой патоген округлой формы, диаметр не превышает 50 нм. В середине располагается одна нить РНК, покрытая капсидом (core-протеином). Снаружи его окружает оболочка, основу строения которой составляют липиды, а вкрапления гликопротеинов Е1 и Е2 имеют вид выступов.

Структуру генома вируса можно представить в виде схемы:

Современный анализ HCV основан на выявлении нескольких маркеров инфекции. Это РНК вируса, core-антиген и специфические антитела. Раньше других в сыворотке крови определяется именно РНК ВГС (вирусного гепатита С). Второй по времени показатель - core-антиген. Его можно обнаружить через неделю после появления РНК в количестве достаточном, для идентификации тест-системами.

Чувствительность анализа на антиген вируса гепатита С зависит от механизма проведения исследования. При хемилюминесцентной детекции она значительно выше (до 0,06 пг/мл), чем при классической иммуноферментной реакции при помощи окисления хромогена пероксидазой. Но чем выше чувствительность анализа, тем дороже система для тестирования.

Уровень РНК вируса в крови тесно связан с концентрацией core-антигена. Так, некоторые методики позволяют определить приблизительную вирусную нагрузку с учетом коэффициента корреляции.

Специфические антитела к вирусу гепатита С определяются при помощи скрининговых иммуноферментных и иммуноблоттинговых тест-систем. Последние отличаются более высокой специфичностью.

Ориентировочный срок появления РНК вируса, антигена и различных типов иммуноглобулинов приведен в таблице:

Большинство применяемых в настоящее время тест-систем были разработаны еще в начале 1990-х годов. При необходимости диагностировать вирус используются антигены, полученные по образцам изолятов 1990-х, соответствующих HCV генотипа 1а. Уже есть информация об отсутствии у некоторых пациентов АТ к core-антигену - одному из самых иммуногенных антигенов ВГС. Это связывают с появлением определенных мутаций. Поэтому, чтобы исключить сомнительные результаты, следует обращаться в лаборатории, работающие с современными тест-системами (производства Abbott, Bayer и др.).

Анти-HCV: что это за анализ?

Существует несколько типов диагностических тестов на гепатит С, которые выполняются при помощи серологической иммуноферментной реакции.

Каждый из них дает специалисту определенную информацию. Это:

• предполагаемое наличие заболевания;
• форма течения вирусной инфекции;
• срок с момента инфицирования;
• реакция иммунной системы на проникновение патогена в кровоток;
• состояние пациента после приема медикаментов либо по итогам самостоятельного выздоровления после острой фазы заболевания.

Описание анализа на суммарные антитела

Исследование начинают с теста Anti-HCV Total, предназначенного для определения суммарных антител (IgG + IgM). Проведение других анализов целесообразно в том случае, если анти HCV положительный: что это значит, может определить только врач. Дело в том, что у некоторых пациентов отмечают ложноположительный результат, что требует дополнительного обследования.

Исследование на антитела к основным структурным белкам HCV

Наиболее показателен анализ крови на core-Ag. Иммуноглобулины к этой структурной субъединице появляются раньше других и служат специфическим лабораторным маркером инфицирования. Но вместе с тем, если АТ не обнаружены, это не исключает заражения. Отрицательный результат может быть обусловлен либо мутацией самого HCV, либо индивидуальными особенностями пациента.

Дальнейший скрининг на гепатит С включает анализ крови анти-HCV на определение спектра различных типов иммуноглобулинов. Так, обнаружение антител класса IgM свидетельствует об остром течении инфекции, анти - HCV IgG говорит в пользу длительной, хронической или латентной формы вирусного заболевания. Но расшифровку результатов должен проводить специалист, который объяснит, что это за анализ, и даст рекомендации по дальнейшему обследованию и лечению.

Точность

Точность иммуноферментного исследования зависит от производителя диагностических тест-систем. Не последнюю роль играет и профессионализм медицинского персонала. Специфичность и достоверность подобного исследования достигает 90%. Поэтому положительный анализ на гепатит С, проведенный серологическим методом, однозначно служит показанием для дальнейшей диагностики.

Но перед тем как сдавать кровь на HbsAg HCV или другие ИФА, необходимо поинтересоваться, на каком оборудовании будет проводиться анализ. При появлении каких-либо вопросов, лучше обратиться к врачу. Качество выполненного исследования полностью определяет тактику проведения дальнейшей диагностики.

Методика проведения анализа на гепатит С

Иммуноферментный анализ на гепатит С относят к серологическим методам исследования.

Тест-системы, при помощи которых выполняется ИФА, делят на несколько групп в зависимости от применяемых типов антител:

• лизатные , в ходе исследования применяют нативные АТ, полученные из культуры;
• рекомбинантные , используют синтезированные при помощи генной инженерии белковые структуры, аналогичные по строению с исследуемым антигеном;
• пептидные , применяют искусственно синтезированные пептиды.

В качестве твердой фазы обычно используют 96-луночные планшеты, реже - полистироловые шарики. Катализируют ИФА ряд специфических биологически активных ферментов.

Проведение иммуноферментного анализа проводится в несколько этапов:

1. Происходит распознавание исследуемого образца антителом. Результат определяют по количеству образовавшихся иммунных комплексов или остаткам свободных мест специфического связывания.
2. Формирование меченного ферментами соединения.
3. Трансформация ферментной метки в определенный сигнал, который регистрируется при помощи какого-либо физико-химического метода (спектрофотометрия, флуориметрия, люминесценция и т.д.).

Существуют такие типы иммуноферментного анализа, выполняемого для диагностики вирусного гепатита С:

• «сэндвич»-метод;
• непрямой ИФА;
• конкурентный метод ИФА;
• ингибирующий ИФА;
• прямой ИФА.

Предварительно пациенту необходимо взять направление от врача. В частной лаборатории сдать анализ можно и без соответствующих документов. Непосредственно перед исследованием медсестра регистрирует данные больного и соответствующим образом маркирует пробирки.

Забор крови осуществляется из вены. Предварительно кожу обрабатывают стерильной салфеткой с дезинфицирующим раствором. После процедуры рану заклеивают одноразовым пластырем. Сроки постановки иммуноферментной реакции составляют от 1 до 5 дней. Результат можно забрать либо непосредственно в лаборатории, либо получить в электронном виде на почту или по коду на сайте.

Показания для ИФА

Обратиться к врачу, а впоследствии и сдать кровь на суммарные антитела к гепатиту С необходимо при возникновении специфических признаков инфекции.

Заподозрить патологию можно по следующим симптомам:

• почти не проходящее чувство усталости;
• нарушения сна (обычно в ночное время суток человек мучается от бессонницы, а в дневное - от сонливости);
• снижение концентрации внимания, замедление остроты умственной деятельности;
• снижение аппетита;
• неприятное чувство распирания, тяжести и дискомфорта в правом подреберье;
• нарушения пищеварения, сопровождающиеся метеоризмом, расстройствами стула, изжогой, отрыжкой, неприятным привкусом во рту;
• желтизна (часто, незначительная и быстро проходящая) кожного покрова, белков глаз.

Но более чем у половины инфицированных вирусная инфекция протекает без выраженной клинической картины, а возникающие признаки легко спутать с ОРВИ или банальным переутомлением. Именно поэтому гепатит С часто выявляют непреднамеренно в ходе подготовки к диспансеризации.

Строгими показаниями к сдаче крови для анализа служат:

• характерные для нарушения функции печени симптомы;
• общее недомогание;
• отклонения от нормы при расшифровке результатов печеночных проб;
• контакт с человеком, у которого подтвержден диагноз гепатита С (половой акт, соприкосновение с кровью или слизистыми и т.д.);
• наличие ВИЧ;
• гемотрансфузия или пересадка органов, выполненная до 1992 года;
• регулярное прохождение процедуры гемодиализа;
• заболевания, требующие частых инвазивных медицинских манипуляций;
• у детей, рожденных от инфицированных HCV матерей;
• оформление медицинской книжки для военнослужащих, работников в сфере торговли, здравоохранения, образования, косметологии, фармации.

Обязательным является проведение ИФА при беременности. Исследование выполняют на 12 и 30 неделе.

Не стоит забывать о таком понятии, как «серологическое окно». Под этим термином подразумевает срок, прошедший с момента инфицирования до времени, когда выявляется вирус, а точнее - вырабатываемые к его антигенам антитела.

Повторное проведение ИФА назначают при:

• неопределенных результатах первого анализа;
• прохождении противовирусной терапии (для контроля титра антител);
• Anti-HCV Total отрицательном, но сохранении симптомов вирусного гепатита.

По мнению специалистов, риску заражения подвергается практически каждый посетитель стоматологического или косметологического кабинета. Поэтому с целью профилактики Анти ВГС Тотал (определение суммарных антител методом ИФА) рекомендуют сдавать ежегодно.

Как подготовиться

Достоверность полученных результатов анализа во многом зависит от правильной подготовки пациента. Рекомендации специалистов включают:

• не есть за 12-14 часов до сдачи крови;
• за 3-4 часа до анализа отказаться от курения;
• сдают кровь в первой половине дня;
• после пробуждения нельзя ничего пить кроме негазированной воды;
• за 3-4 дня до исследования исключить жирную пищу, жареные блюда, приготовленные с большим количеством масла, «тяжелые» соусы (майонез, тартар и т.д., особенно покупные), фастфуд (включая снеки и закуски), колбасные изделия, копчености, сушеную, вяленую рыбу и/или мясо, в целом меню перед анализом должно составляться по диете №5;
• за 7-10 дней до ИФА категорически противопоказаны спиртные напитки (вне зависимости от крепости).

В целом перед сдачей крови необходимо придерживаться принципов рационального правильного питания, по возможности отказаться от вредных привычек.

При обращении к врачу с результатами анализа необходимо сообщить обо всех принимаемых медикаментах, возможных нарушений правил подготовки к исследованию, сопутствующих заболеваниях. Также следует рассказать о беспокоящих симптомах, даже если, на первый взгляд, они не имеют отношения к поражению печени.

Расшифровка полученных результатов

Расшифровка Anti HCV должна проводиться профильным специалистом (инфекционистом или гепатологом). В норме антител к гепатиту С в организме человека не должно быть.

Однако ложноотрицательный результат возможен при:

• периоде «серологического окна»;
• сопутствующем иммунодефиците (при вирусном поражении иммунитета выработка АТ прекращается);
• онкологических поражениях системы кроветворения.

Ложноположительный результат ИФА HCV AgAt иногда отмечают при:

• беременности (из-за выработки специфических белковых соединений, схожих по структуре с иммуноглобулинами);
• аутоиммунных патологиях (при таких заболеваниях продукция антител носит непредсказуемый характер);
• нарушениях системы кроветворения;
• выздоровлении после фазы острого гепатита С (у некоторых людей вирус уничтожается иммунной системой без медикаментозной терапии);
• предшествующей противовирусной терапии (иммуноглобулины могут сохраняться до 3-5 лет и более);
• у ребенка до 3 лет при рождении после беременности у инфицированной или прошедшей лечение матери;
• сопутствующих тяжелых инфекциях (вне зависимости от их этиологии), в таком случае ошибочные результаты возможны из-за массивного выброса антител в ответ на вирусное или бактериальное поражение тканей.

Расшифровку результатов иммуноферментного анализа можно представить в виде таблицы:

Начиная с 9 недели	Результат и описание возможной патологии
Определение суммарных антител (Anti-HCV Total analiz)	Положительный. Требуется: проведение ИФА на IgG и IgM; выполнение качественной ПЦР. Отрицательный означает, что человек здоров. Но подтверждающими анализами для исключения инфекции служит ПЦР (качественное определение РНК вируса) или повторное ИФА через 4-8 недель.
ИФА Core-Ag	Положительный результат свидетельствует о недавнем инфицировании
Anti-HCV IgM	Позитивный тест возможен при остром гепатите С. Если одновременно выявлены IgG вероятно обострение хронически протекающего вирусного процесса
IgG (к различным структурным белкам)	Обнаружение говорит в пользу хронического HCV

При обнаружении иммуноглобулинов в бланке с результатами анализов в обязательном порядке указывается их титр (концентрация). Таким образом врач может судить об интенсивности патологического процесса и оценить иммунный ответ. Но точную информацию о количественном содержании вируса в организме человека может дать только выявление РНК методом полимеразной цепной реакции.

Согласно концепциям современной медицины превосходство распространенности на земном шаре принадлежит вирусам. Человечеству пришлось задействовать много сил и ресурсов для борьбы с ними. Крайне важная роль принадлежит диагностике вирусных поражений печени, в частности вирусного гепатита С. Правильная расшифровка лабораторных показателей для выявления этого заболевания затруднена из-за большого количества ложноположительных результатов анализа крови. Поэтому так важен правильный выбор и интерпретация проведенного исследования.

Способы обнаружения вируса

Вирус гепатита С (hcv) представляет собой мелкую цепь РНК внутри вирусной оболочки, которая для своего размножения использует генетический материал печеночных клеток. Непосредственный их контакт приводит к:

• Запуску воспалительного процесса в печени;
• Разрушению печеночных клеток (цитолиз);
• Запуску иммунных механизмов с синтезом специфических антител;
• Аутоиммунной агрессии иммунных комплексов в отношении воспаленных гепатоцитов.

Вирус гепатита С, попадая в организм, вызывает очень медленный иммунный ответ, что оставляет его длительное время незамеченным. Болезнь часто обнаруживается лишь на стадии цирроза печени, хотя все время вирусные частицы и соответствующие им антитела циркулируют в крови. На этом основаны все известные методы диагностики hcv-инфекции. К ним можно отнести:

1. Серологические тесты в условиях лаборатории;
2. ПЦР-диагностика (полимеразная цепная реакция);
3. Экспресс-тесты для определения заболевания в домашних условиях.

Важно помнить!!! Диагностика вирусного гепатита С достаточно сложная. Это связано с высокой мутирующей способностью возбудителя заболевания. За короткий срок он способен приобретать новые антигенные свойства, что делает его практически незаметным для иммунных клеток и тестов серологической диагностики.

Видео о гепатите С:

Возможные показания для исследования

Пройти тестирование на hcv-инфекцию может любой желающий. Особых показаний для этого не нужно, кроме желания человека пройти этот анализ крови. Но существует категория лиц, которые в обязательном порядке подлежат исследованию. К ним относятся:

• Доноры крови;
• Люди, которым проводилось переливание крови, ее компонентов или препаратов на ее основе;
• Повышение уровня печеночных трансаминаз (АлАТ, АсАТ), особенно после предшествующих оперативных вмешательств, родов и других медицинских манипуляций;
• Подозрение на вирусный гепатит С или необходимость исключения этого диагноза;
• Отрицательные тесты на вирусный гепатит В при наличии симптомов воспаления печени;
• Контроль эффективности терапии hcv-инфекции и решение вопросов, касающихся тактики дальнейшего лечения.

Особенности серологической диагностики и оценка результатов

Лабораторный анализ крови на hcv предполагает обнаружение антител (иммуноглобулинов) классов M и G к антигенным компонентам вируса гепатита С. Для этого используются в основном реакции иммуноферментного анализа (ИФА) и радиоиммунный анализ (РИА). Лабораторные методы обнаружения антител считаются самыми достоверными, поскольку они позволяют использовать в качестве реагентов несколько антигенных комплексов самых распространенных типов вируса гепатита С.

Для исследования производится забор около 20 миллилитров венозной крови из периферической вены. Ее центрифугируют и отстаивают для получения плазмы (жидкой прозрачной части). Форменные элементы и осадок удаляются. Для исключения ложноположительных результатов лучше производить забор крови в утреннее время до приема пищи. За несколько дней до этого желательно исключить прием медикаментов, особенно влияющих на состояние иммунной системы.

Результаты проведенных анализов могут быть представлены таким образом:

1. Hcv – отрицательный. Это значит, что в организме антител к вирусу гепатита С не обнаружено. Заболевания нет;
2. Hcv – положительный. Это говорит о наличии в исследуемых образцах крови антител к вирусу гепатита С. Человек либо переболел этим заболеванием, либо болеет в данный момент острой или хронической его формой;
3. Обнаружено анти-hcv IgG. В таком случае стоит думать о хроническом вирусном гепатите С;
4. Обнаружено анти-hcv IgМ. Его изолированное наличие говорит об остром процессе, а сочетание с анти-hcv IgG – об обострении хронического.

Экспресс-тестирование на hcv – первый шаг в обнаружении заболевания

Особенности экспресс-тестирования

Любой человек может провести анализ крови на hcv самостоятельно. Это стало возможно благодаря созданию специальных тест-систем для экспресс-диагностики вирусного гепатита С. Их результативность уступает лабораторным серологическим методам, но отлично подходит для ориентировочного определения возможного инфицирования в короткое сроки.

Приобрести или заказать тестовую систему можно в любой аптеке. Она включает в себя все необходимое для проведения теста. Анализ начинают с вскрытия стерильного контейнера и подготовки всех компонентов. После обработки специальной салфеткой с антисептиком пальца его аккуратно прокалывают скарификатором. При помощи пипетки набирается 1-2 капли крови и переносятся в углубление на тест-планшете. К крови добавляют 1-2 капли реагента из флакона, который входит в состав теста. Результат должен оцениваться через 10 минут. Крайне важно не оценивать результат позже 20 минут в связи с возможностью ложноположительного результата.

Проведенный анализ крови может быть расценен так:

1. В окошке планшета появилась одна фиолетовая полоска (тест отрицательный). Это значит, что антитела к hcv в исследуемой крови не обнаружены. Человек здоров;
2. В окошке планшета появилось две фиолетовые полоски (тест положительный). Это говорит о наличии антител в исследуемой крови и связи организма с вирусным гепатитом С. Такие люди подлежат более тщательным методам серологической диагностики в обязательном порядке;
3. В окошке планшета не появилось ни одной полоски. Тест-система испорчена. Рекомендуется повторное тестирование.

Важно помнить!!! Антитела к вирусу гепатита С в крови появляются через 9-12 недель после инфицирования. Для большей достоверности диагностики обязательно должны сочетаться серологические методы с ПЦР-исследованием крови на hcv!!!

Вирус гепатита С содержит РНК и обладает низкой антигенной активностью

Особенности ПЦР диагностики

Полимеразная цепная реакция – это самый современный способ обнаружения генетического материала любых клеток. В отношении вирусного гепатита С метод позволяет обнаружить РНК-молекулы вирусных частиц. Это можно сделать качественным и количественным методом. Первый способ может оказаться неинформативным, если количество вирусных частиц в исследуемой крови не достигнет порогового значения. Второй способ позволяет точно указать количество обнаруженных вирусных цепей РНК и более чувствителен.

Проведенный анализ может быть представлен такими результатами:

1. РНК Hcv не обнаружено. Это значит, что в исследуемой крови нет вирусных частиц;
2. РНК hcv обнаружены. Это говорит об инфицировании гепатитом С;
3. Количественный hcv-тест ПЦР проводится для оценки степени инфицированности крови больного и активности размножения вируса в организме. Высокой считается вирусная нагрузка крови от 600 до 700 МЕ/мл. Показатели выше этой цифры называют очень высокими, ниже ее – низкой вирусной нагрузкой крови.

Анализ крови на hcv при диагностике вирусного гепатита С – это единственный информативный, доступный и безвредный метод верификации диагноза. Правильная интерпретация и комбинирование разных способов его проведения минимизируют количество диагностических ошибок.

Вирусный гепатит С представляет серьезную медико-социальную проблему. Около 180 млн. человек в мире сегодня страдают этим заболеванием, 350 тысяч ежегодно умирает. Длительное скрытое (бессимптомное) течение заболевания приводит к запоздалой диагностике. Анализ на гепатит С проводится с целью диагностики заболевания, дифференциальной диагностики, с его помощью определяют ранее перенесенное заболевание «на ногах».

Исследование применяется у лиц с симптомами гепатита С, повышенным уровнем ферментов печени, при получении сведений о перенесенном ранее заболевании неуточненной этиологии, у лиц из групп риска и скрининговых исследованиях.

Диагностика гепатита С проводится в 2 этапа:

1 этап. Определение наличия в сыворотке крови антител к вирусу (анти HCV).

2 этап. При наличии анти HCV проводится тест на наличие РНК (рибонуклеиновой кислоты) методом ПЦР на гепатит С. Тест позволяет выявить фазу процесса — «активная/неактивная», решить вопрос о необходимости лечения. Известно, что около 30% инфицированных лиц, самостоятельно избавляются от инфекции, так как имеют сильную иммунную систему и в лечении не нуждаются. С помощью ПЦР определяется генотип вируса. Разные генотипы по-разному реагируют на лечение.

Степень поражения печени определяется с помощью биопсии или других инвазивных и неинвазивных тестов (например, фибротест). Степень стеатоза печени определяется с помощью стеатотеста. Во всех случаях диагностика гепатита С должна базироваться на данных эпидемиологического расследования, клинике заболевания и данных биохимического исследования крови.

Рис. 1. Тяжелые последствия вирусного поражения печени — напряженный асцит.

Анализ на гепатит С: анти HСV

Антитела к вирусам (анти HCV) являются специфическими маркерами инфицирования. В организме больного человека к белкам вируса (антигенам) вырабатываются специфические антитела — иммуноглобулины класса IgM и IgG (анти HCV IgM/IgG).

При получении положительного результата на антитела выполняется подтверждающий тест — определение суммарных антител к структурным и неструктурным белкам вируса. К структурным оболочечным белкам вируса Е1 и Е2 вырабатываются aнти HCV IgM, нуклеокапсидному белку С — cor (aнти HCV IgG), к 7-и неструктурным белкам-ферментам NS (aнти HCV NS IgG).

Для выявления антител к вирусу гепатита С используется иммуноферментный анализ (ИФА). Для подтверждения (+) результатов ИФА применяют подтверждающие тесты — RIBA (рекомбинатный иммуноблотинг), реже Inno-Lia (анализ синтетических пептидов).

Анализ на анти HCV IgM

• Антитела IgM появляются в сыворотке крови через 4 — 6 недель после инфицирования и быстро достигают максимума. По окончании острого процесса (через 5 — 6 мес.) их концентрация падает.
• Длительная регистрация наличия анти HCV IgM говорит о том, что гепатит С приобрел хроническое течение.
• Повышение уровня IgM в период хронического течения говорит о реактивации .
• Уровень иммуноглобулинов IgM позволяет проводить оценку эффективности лечения.

Анализ на анти HCV IgG

Антитела IgG появляются в сыворотке крови больного через 11 — 12 недель после инфицирования. На 5 — 6 месяце регистрируется пик концентрации. Далее антитела сохраняются на постоянном уровне в течение всего срока заболевания в острый период и период выздоровления.

Анализ на суммарные антитела к вирусу гепатита С

Суммарные антитела к вирусу (аnti HCV total) используются для диагностики «свежих» случаев заболевания. Суммарные антитела — это антитела нуклеокапсидному белку С — cor (aнти HCV IgG) и 7-и неструктурным белкам-ферментам NS (aнти HCV NS IgG) — aнти HCV NS3, aнти HCV NS4 и aнти HCV NS5.

Суммарные антитела к вирусу гепатита С появляются в сыворотке крови инфицируемого спустя 11 — 12 недель от начала инфицирования, достигают пика к 5 — 6 месяцу и сохраняются на постоянном уровне в течение всего срока заболевания в острый период и в течение 5 — 9 лет после периода выздоровления.

Каждый из видов антител имеет самостоятельное диагностическое значение:

• Анти HCV C (cor) являются основными показателями контакта с вирусами гепатита С.
• Анти HCV NS3 выявляются одними из первых в процессе сероконверсии (выработки антител в ответ на присутствие вируса), указывают на остроту инфекционного процесса и свидетельствуют о высокой вирусной нагрузке. С их помощью определяется гепатит С у больных, не подозревающих у себя наличие инфекции. Продолжительное нахождение анти HCV NS3 в сыворотке крови говорит о высоком риске хронизации процесса.
• Анти HCV NS4 говорят о том, что гепатит С имеет длительное течение. По уровню титров антител можно судить о степени поражения печени.
• Анти HCV NS5 указывают на наличие вирусной РНК. Их обнаружение в острый период является предвестником хронизации процесса. Высокие титры антител на фоне лечения говорят о том, что больной не отвечает на лечение.
• Анти HCV NS4 и анти HCV Данный вид антител появляются на поздних сроках развития гепатита. Их снижение указывает на формирование ремиссии инфекционного процесса. После излечения титры антител NS4 и NS5 снижаются в течение 8 — 10 лет. От повторного заражения этот вид антител не защищает.

Рис. 2. Макропрепарат. Цирроз печени — грозное осложнение вирусного гепатита С.

Расшифровка анализа на гепатит С — анти HСV

Отсутствие антител к вирусу гепатита С обозначается термином «Норма». Однако это не всегда это обозначает отсутствие заболевания у человека. Так отсутствие антител в крови у инфицированного человека регистрируется до момента их появления в крови — в срок до 6-и месяцев с момента заражения (в среднем через 12 недель). Период отсутствия антител в крови инфицируемого называется «серологическим окном». Высокой специфичностью (до 99,7%) обладают тест-системы 3-го поколения (ELISA-3). Около 0,3% приходится на получение ложноположительных результатов.

Наличие анти HCV свидетельствуют о текущей инфицированности или перенесенной в прошлом инфекции.

• Обнаружение антител IgM и антител Corе IgG , нарастание титров антител Corе IgG и (+) результат ПЦР при наличии клинических и лабораторных признаков острого гепатита говорит об остром периоде заболевания.
• Обнаружение антител IgM, анти HCV Corе IgG, анти HCV NS IgG и (+) результат ПЦР при наличии клинических и лабораторных признаков заболевания указывает на реактивацию хронического гепатита С.
• Обнаружение анти HCV Corе IgG и анти HCV NS IgG при отсутствии клинических и лабораторных признаков заболевания и отрицательном результате ПЦР говорит о наличии у больного хронического гепатита в латентной фазе.

Рис. 3. Макропрепарат печени. Первичный рак печени — грозное осложнение гепатита С.

ПЦР на гепатит С

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является «золотым стандартом» диагностики вирусного гепатита С. Высокая чувствительность теста позволяет выявлять генетический материал вирусов (РНК) даже если их в исследуемом материале единицы. ПЦР способна выявлять РНК вирусов задолго до появления антител в сыворотке крови, но не ранее чем с 5-го дня от момента инфицирования. При заболевании с помощью ПЦР РНК вирусов обнаруживаются не только в сыворотке крови, но и в биоптатах печени.

• Полимеразная цепная реакция позволяет определить наличие или отсутствие в крови вирусов гепатита С и решить вопрос о начале лечения. Известно, что до 30% больных самостоятельно избавляются от инфекции, так как имеют сильную иммунную систему и в лечении не нуждаются.
• С помощью ПЦР определяется генотип вируса. Разные генотипы по-разному реагируют на лечение.
• ПЦР применяется с целью контроля за эффективностью лечения.
• ПЦР применяется при отсутствии антител в крови, но при наличии весомых подозрений на заболевание (повышение уровня щелочной фосфатазы, общего билирубина, превышение в 2 раза печеночных ферментов АСТ и АЛТ).
• Анализ ПЦР на гепатит С используется с целью контроля над внутриутробной передачей вирусов гепатита.

Вирусная нагрузка при гепатите С

С помощью анализа ПЦР возможно определить не только наличие РНК вирусов в крови — качественный анализ (обнаружено/не обнаружено), но и их количество — вирусную нагрузку (количество единиц вирусной РНК в 1 мл крови). Количественный показатель ПЦР применяется с целью контроля эффективности лечения.

Методы, применяющиеся для проведения ПЦР, обладают разной чувствительностью. В РФ согласно методическим рекомендациям 2014 года рекомендовано применять методики, обладающие чувствительностью 25 МЕ/мл и менее. Согласно рекомендациям Европейской ассоциации по изучению печени 2015 года предлагается применять методики определения вирусной РНК, обладающих чувствительностью 15 МЕ/мл и менее.

В зависимости от чувствительности тест-системы больной получает тот или иной результат исследования:

• Минимальная чувствительность анализатора COBAS AMPLICOR составляет 600 МЕ/мл (анализатор старого поколения).
• Минимальная чувствительность анализатора COBAS AMPLICOR ВГС-TEST составляет 50 МЕ/мл, что составляет 100 копий в 1 мл.
• Минимальная чувствительность анализатора РеалБест РНК ВГС составляет 15 МЕ/мл, что составляет 38 копий в 1 мл (входит в группу современных тест-систем). Специфичность данных анализаторов составляет 100%. С их помощью выявляются РНК вирусов гепатита С субтипов 1а и 1b, 2а, 2b, 2c и 2i, 3, 4, 5а и 6.

При наличии копий РНК ниже порога чувствительности данного анализатора пациент получает ответ «не обнаружено».

Рис. 4. Пример анализа ПЦР (количественный тест). Определение вирусной нагрузки.

Интерпретация результатов анализа ПЦР на гепатит С

• Отсутствие РНК вируса указывает на отсутствие инфицирования.
• Отсутствие РНК в анализе на фоне наличия антител в крови указывает на исчезновение болезни под влиянием лечения или при самоизлечении.
• В ряде случаев вирус присутствует в крови, но в подпороговых уровнях, когда его концентрация не улавливается анализаторами. Такие больные остаются опасными в плане заражения.
• Выявление РНК вируса в течение 6 месяцев подряд у больных с острым гепатитом С говорит о том, что заболевание приняло хроническое течение.
• Снижение вирусной РНК в анализах на фоне лечения говорит об эффективности проводимой терапии и наоборот.

Рис. 5. Макропрепарат. Жировой гепатоз — одно из последствий заболевания.

Основные биохимические анализы крови при гепатите С

Биохимические анализы крови помогают установить функциональное состояние многих органов и систем человека.

Анализ крови на печеночные ферменты АЛТ и АСТ

Печеночные ферменты синтезируются внутриклеточно. Они принимают участие в синтезе аминокислот. Их большое количество находится в клетках печени, сердца, почек и скелетной мускулатуры. При поражении органов (нарушение целостности клеточных мембран) ферменты поступают в кровь, где их уровень повышается. Повышенный уровень ферментов регистрируется при поражении (лизисе, разрушении) печеночных клеток, инфаркте миокарда и других заболеваниях. Чем выше уровень трансаминаз в сыворотке крови, тем больше клеток подверглось разрушению. АЛТ преобладают в клетках печени, АСТ — в клетках миокарда. При разрушении клеток печени уровень АЛТ повышается в 1,5 — 2 раза. При разрушении клеток миокарда уровень АСТ повышается в 8 — 10 раз.

При диагностике хронического вирусного гепатита необходимо обращать внимание на соотношение АСТ/АЛТ (коэффициент де Ритиса). Превышение уровня АСТ над АЛТ говорит о поражении печеночных клеток.

• Норма АСТ для мужчин составляет до 41 ед./л, женщин — до 35 ед./л, детей старше 12 лет — до 45 ед./л.
• Норма АЛТ для мужчин составляет до 45 ед./л, женщин — до 34 ед./л, дети 12 лет и старше — до 39 ед./л.
• В норме (у здоровых людей) коэффициент АСТ/АЛТ имеет значение от 0,91 — 1,75.

Анализ крови на билирубин

Билирубин является продуктом распада гемоглобина. Билирубин в крови содержится в виде непрямого (до 96%) и прямого (4%). Процесс распада этого вещества происходит, в основном, в клетках печени, откуда с желчью выводится из организма. При разрушении клеток печени уровень билирубина в сыворотке крови возрастает. В норме содержание общего билирубина составляет менее 3,4 — 21,0 мкмоль/л. При уровне 30 — 35 мкмоль/л и выше билирубин проникает в ткани, из-за чего кожа и склеры приобретают желтушную окраску.

Рис. 6. Желтуха — один из признаков поражения печени.

Врачи-инфекционисты нередко назначают пациентам анализ крови Anti hcv total. Что это такое? Обследование является одним из методов диагностики гепатита C. Анализ делают при подозрении на это заболевание. Иногда исследование крови проводят людям, находящимся в группе риска по гепатиту, с целью профилактики инфекции.

Что такое гепатит C?

Гепатит C - это заболевание, вызываемое вирусом HCV. Инфекция передается через кровь и половым путем. Возбудитель болезни поражает клетки печени, в запущенных случаях возникает цирроз. Патология проявляется следующими симптомами:

• слабостью и утомляемостью;
• патологическим разрастанием печеночной ткани;
• вздутием живота и увеличением селезенки;
• кожа и белки глаз становятся желтоватыми.

Такие явно выраженные признаки могут возникнуть через 14 дней после того, как вирус попадает в организм. Но нередко инкубационный период затягивается до полугода. Гепатит - коварное заболевание, длительное время у больного могут отсутствовать какие-либо жалобы. За этот период вирус успевает поразить большую часть печеночных клеток.

Чтобы выявить болезнь как можно раньше, врачи дают направление на анализ крови Anti hcv total. Что это исследование дает для диагностики? Оно позволяет с высокой точностью определить наличие вируса задолго до возникновения первых симптомов гепатита C. Это дает возможность назначить терапию как можно скорее, пока болезнь еще не начала разрушать печень.

Кому назначают анализ?

Прежде всего, инфекционисты назначают этот анализ пациентам с признаками поражения печени, чтобы определить тип заболевания. Это исследование показано и больным гепатитом, проходящим курс терапии, для выявления эффективности лечения.

Кроме этого, исследование назначают людям, которые имеют повышенный риск заражения:

• лицам, получившим переливание крови до проведения обязательного исследования донора на гепатит C;
• детям, рожденным от инфицированных матерей;
• ВИЧ-инфицированным;
• пациентам, находящимся на гемодиализе;
• медицинским работникам;
• больным перед проведением операции;
• пациентам с отклонениями в биохимическом исследовании крови на билирубин и печеночные ферменты;
• людям, употребляющим (или употреблявшим в прошлом) наркотики в виде инъекций.

Anti hcv total анализ крови: что это?

У человека, зараженного вирусом гепатита C, в организме образуются специальные белковые соединения (иммуноглобулины или антитела). Так иммунная система реагирует на белки возбудителя заболевания (антигены). Если патология протекает скрыто, то антитела начинают образовываться через 90 дней после инфицирования. При острых проявлениях гепатита антитела появляются через 14 дней после возникновения первых признаков болезни.

Обнаружить иммуноглобулины помогает исследование Anti hcv total на антитела к антигенам вируса гепатита C. В этом случае удается выявить болезнь на ранней стадии. Для анализа берут кровь из вены. Затем определяют, есть ли в исследуемом материале иммуноглобулины против вируса HCV. У больного человека в крови присутствуют антитела класса M и G. При анализе определяется их суммарное количество. Точность исследования - около 90 %.

Но антитела к вирусу обнаруживаются и в крови пациентов, переболевших гепатитом в прошлом. Они остаются и после болезни.

У пациентов с острой формой болезни в крови находятся иммуноглобулины M. Антитела G обычно определяются при хронизации гепатита или у пациентов на стадии выздоровления.

Другие исследования на гепатит

Кроме анализа крови на Anti hcv total существуют и другие методы диагностики гепатита. Что это за исследования и насколько точными они являются, рассмотрим дальше.

Врач может заподозрить гепатит по показателям анализа на биохимический состав крови. У больных людей значения билирубина и печеночных ферментов (АСТ и АЛТ) в несколько раз больше нормы. Но это не всегда говорит о гепатите. Такие же данные могут наблюдаться при тяжелых интоксикациях. Поэтому одного только анализа на биохимию недостаточно для точной диагностики болезни. При каких-либо отклонениях в печеночных показателях врач всегда назначает дополнительную диагностику, включающую и исследование на антитела.

Выявить гепатит на ранних стадиях помогает исследование крови методом В настоящее время это самый точный анализ, который основан на определении РНК возбудителя болезни. Этот метод диагностики позволяет вычислить то есть концентрацию инфекции в плазме крови. Такое исследование могут назначить при положительном анализе крови на Anti hcv total, то есть при обнаружении антител. Это помогает оценить эффективность выбранного способа лечения.

Иногда ПЦР не обнаруживает РНК вируса, несмотря на то что в анализе на антитела выявлены специфические иммуноглобулины. Так бывает у пациентов, переболевших гепатитом в прошлом.

Как сдают анализ

Это исследование не требует сложной подготовки. Однако необходимо соблюдать некоторые рекомендации перед проведением анализа крови Anti hcv total. Что это за правила?

1. Иследование всегда проходят утром натощак. Можно только пить чистую воду.
2. За день до сдачи крови из рациона исключают острые, жирные, сладкие, соленые блюда и алкоголь.
3. За несколько часов до сдачи анализа не следует курить.
4. Если пациент принимает какие-либо лекарственные средства, нужно предупредить об этом врача.

Нормы анализа

Для этого исследования не существует количественных нормативов. Есть только 2 варианта показателей Anti hcv total анализа - положительный и отрицательный. Результаты исследования обычно бывают готовы через неделю, так как данные иногда требуют подсчетов и дополнительных проверок. Бланк с показателями необходимо предъявить лечащему врачу. Только медик сможет правильно интрепретировать данные анализа.

Что такое положительный анализ крови Anti hcv total? Это означает, что в крови пациента присутствуют антитела к вирусу гепатита C. Чаще всего такой результат говорит о заболевании, но есть и исключения из этого правила.

Если в анализе крови Anti hcv total отрицательный свидетельствует об отсутствии антител к гепатиту C. Но это не всегда означает, что человек здоров.

Отрицательный результат

Такой показатель означает, что в настоящий момент у пациента не вырабатываются иммуноглобулины против белков вируса гепатита C. Чаще всего это означает, что человек не болен. Но успокаиваться рано, отсутствие антител еще не говорит о том, что заражения не было. Если у пациента имеются симптомы со стороны печени, то врач назначит дополнительные исследования. Отрицательный результат может наблюдаться и у больных людей в следующих случаях:

1. Человек заражен гепатитом, но с момента инфицирования прошло слишком мало времени, антитела еще не вырабатываются.
2. Существует серонегативная форма гепатита C, при которой иммуноглобулины не продуцируются.

Поэтому, если пациента беспокоит печень, то обследование необходимо продолжать даже при отрицательных результатах анализа. Возможно, врач назначит диагностику методом ПЦР, которая точно покажет наличие вируса.

Положительный результат

Положительный анализ крови Anti hcv total в большинстве случаев говорит о заражении гепатитом. Иногда это может свидетельствовать о ранее перенесенной болезни, тогда врача необходимо предупредить о том, что у пациента в прошлом был гепатит.

При таком результате назначают дополнительные исследования. Существует 6 генотипов вируса, и лечение каждого из них имеет свою специфику. Поэтому для правильного выбора метода терапии проводят анализ на генотип возбудителя болезни.

Бывают крайне редкие случаи, когда человек не болен, но анализ крови Anti hcv total положительный. Что это означает? Такое встречается при серьезных сбоях в работе иммунной системы. Ложноположительный результат анализа может быть при следующих патологиях:

• аутоиммунных заболеваниях;
• опухолях;
• инфекционных заболеваниях.

Однако, анализ дает искаженные результаты в исключительных случаях. И обычно наличие антител говорит о заражении вирусом гепатита. Схемы лечения заболевания зависят от генотипа микроорганизма, но есть общие принципы терапии:

• назначение противовирусных препаратов с действующими компонентами "Софосбувир" и "Даклатасвир", а также лекарств на основе интерферона;
• прием гепатопротекторов, например, "Эссенциале", "Фосфоглиф", "Карсил", "Силимар";
• регулярное употребление иммуномодуляторов типа "Задаксина", "Тимогена";
• соблюдение диеты с ограничением соленой, острой, жирной и жареной пищи.

Если результат анализа на антитела оказался положительным, врач диагностировал гепатит C, то отчаиваться не стоит. Это не приговор. При современных методах диагностики и лечения прогноз заболевания оказывается благоприятным в 95 % случаев.

Впервые о вирусе заговорили в конце 20-го столетия, после чего начались его полномасштабные исследования. На сегодня известно о шести его формах и большом количестве подтипов. Такая вариабельность структуры обусловлена способностью возбудителя мутировать.

В основе развития инфекционно-воспалительного процесса в печени лежит деструкция гепатоцитов (ее клеток). Они разрушаются под непосредственным влиянием вируса, обладающего цитотоксическим действием. Единственным шансом выявить патогенного агента на доклинической стадии является лабораторная диагностика, которая подразумевает поиск антител и генетического набора вируса.

Что такое антитела гепатита С в крови?

Человеку, далекому от медицины, сложно понять результаты лабораторных исследований, не имея представления об антителах. Дело в том, что структура возбудителя состоит их комплекса белковых компонентов. Они после проникновения в организм вызывают реакцию иммунной системы, как бы раздражая ее своим присутствием. Таким образом начинается продукция антител к антигенам гепатита С.

Они могут быть нескольких видов. Благодаря оценке их качественного состава врачу удается заподозрить инфицирование человека, а также установить стадию заболевания (в том числе и выздоровление).

Первичным методом выявления антител к гепатиту С является иммуноферментное исследование. Его цель заключается в поиске специфических Ig, которые синтезируются в ответ на проникновение инфекции в организм. Заметим, что ИФА позволяет заподозрить болезнь, после чего требуется дальнейшее проведение полимеразной цепной реакции.

Антитела даже после полной победы над вирусом остаются на всю жизнь в крови человека и свидетельствуют о прошлом контакте иммунитета с возбудителем.

Фазы болезни

Антитела к гепатиту С могут указывать на стадию инфекционно-воспалительного процесса, что помогает специалисту подобрать эффективные противовирусные лекарства и отследить динамику изменений. Выделяют две фазы заболевания:

• латентная. У человека отсутствуют какие-либо клинические симптомы, несмотря на то, что он уже является вирусоносителем. В то же время анализ на антитела (IgG) к гепатиту С будет положительный. Уровень РНК и IgG - небольшой.
• острая - характеризуется нарастанием титра антител, в частности IgG и IgМ, что указывает на интенсивное размножение возбудителей и выраженную деструкцию гепатоцитов. Их разрушение подтверждается ростом печеночных ферментов (АЛТ, АСТ), что выявляется биохимией. Кроме того, обнаруживается РНК патогенного агента в высокой концентрации.

Положительная динамика на фоне лечения подтверждается снижением вирусной нагрузки. При выздоровлении РНК возбудителя не обнаруживается, остаются лишь иммуноглобулины G, которые указывают на перенесенное заболевание.

Показания для ИФА

В большинстве случаев иммунитет не может самостоятельно справиться с возбудителем, так как ему не удается сформировать мощный ответ против него. Это обусловлено изменением структуры вируса, вследствие чего вырабатываемые антитела оказываются неэффективными.

Обычно ИФА назначается несколько раз, так как возможет отрицательный результат (вначале болезни) или ложноположительный (у беременных, при аутоиммунных патологиях или проведении анти-ВИЧ терапии).

Чтобы подтвердить или опровергнуть ответ ИФА, необходимо его повторно провести через месяц, а также сдать кровь для ПЦР и биохимии.

Антитела к вирусу гепатита С исследуются:

Иммуноферментный анализ используется в качестве скрининга для массового обследования людей и поиска вирусоносителей. Это позволяет предупредить вспышку инфекционного заболевания. Лечение, начатое на начальной стадии гепатита, значительно эффективнее терапии на фоне цирроза печени.

Чтобы правильно трактовать результаты лабораторной диагностики, нужно знать, какими бывают антитела, и что они могут означать:

1. анти-HCV IgG - основной вид антигенов, представленных иммуноглобулинами G. Их можно обнаружить при первичном обследовании человека, благодаря чему удается заподозрить болезнь. При положительном ответе стоит задуматься о вялотекущем инфекционном процессе или произошедшем контакте иммунитета с вирусов в прошлом. Пациенту необходимо дальнейшее проведение диагностики с помощью ПЦР;
2. анти-HCVcoreIgM. Этот тип маркера означает «антитела к ядерным структурам» патогенного агента. Они появляются в ближайшее время после заражения и указывают на острое заболевание. Нарастание титра отмечается при снижении силы иммунной защиты и активации вирусов при хроническом течении болезни. При ремиссии маркер слабоположительный;
3. анти-HCV total - суммарный показатель антител к структурным белковым соединениям возбудителя. Зачастую именно он позволяет точно диагностировать стадию патологии. Лабораторное исследование становится информативным спустя 1-1,5 месяца от момента проникновения HCV в организм. Суммарные антитела к вирусу гепатита С представляют собой анализ иммуноглобулином М и G. Их рост наблюдается в среднем через 8 недель после инфицирования. Они сохраняются на всю жизнь и свидетельствуют о перенесенной болезни или ее хроническом течении;
4. анти-HCVNS. Показатель представляет собой антитела к неструктурным белкам возбудителя. К ним относится NS3, NS4 и NS5. Первый вид обнаруживается вначале болезни и указывает на контакт иммунитета с HCV. Он является индикатором инфицирования. Длительное сохранение его высокого уровня - косвенный признак хронизации вирусно-воспалительного процесса в печени. Антитела к оставшимся двум видам белковых структур выявляются на поздней стадии гепатита. NS4 - показатель степени поражения органа, а NS5 - свидетельствует о хроническом течении заболевания. Снижение их титров можно расценивать как начало ремиссии. Учитывая высокую стоимость лабораторного исследования, оно достаточно редко применяется на практике.

Существует также еще один маркер - это HCV-RNA, который подразумевает поиск генетического набора возбудителя в крови. В зависимости от вирусной нагрузки носитель инфекции может быть более или менее заразный. Для исследования используются тест-системы с высокой чувствительностью, что дает возможность обнаружить патогенного агента на доклинической стадии. Кроме того, при помощи ПЦР можно выявить инфекцию на этапе, когда антитела еще отсутствуют.

Время появления антител в крови

Важно понимать, что антитела появляются в разное время, что позволяет более точно установить стадию инфекционно-воспалительного процесса, оценить риск возникновения осложнений, а также заподозрить гепатит вначале развития.

Суммарные иммуноглобулины начинают регистрироваться в крови на втором месяце инфицирования. В первые 6 недель стремительно нарастает уровень IgM. Это свидетельствует об остром течении заболевания и высокой активности вируса. После наступления пика их концентрации наблюдается ее уменьшение, что указывает на начало следующей фазы болезни.

Если обнаружены антитела класса G к гепатиту С, стоит заподозрить окончание острой стадии и переход патологии в хроническую. Они выявляются спустя три месяца от момента попадания инфекции в организм.

Иногда суммарные антитела удается выделить уже на втором месяце болезни.

Что касается анти-NS3, то они обнаруживаются на раннем этапе сероконверсии, а анти-NS4 и -NS5 - на более поздней стадии.

Расшифровка исследований

Для выявления иммуноглобулинов используется метод ИФА. Он основан на реакции антиген-антитело, которая протекает под действием специальных ферментов.

В норме суммарный показатель не регистрируется в крови. Для количественной оценки антител применяется коэффициент позитивности «R». Он обозначает плотность исследуемого маркера в биологическом материале. Его референсные значения составляют от нуля до 0,8. Диапазон 0,8-1 свидетельствует о сомнительном ответе диагностики и требует дальнейшего обследования пациента. Положительный результат считается при превышении R единицы.

Если проведена ИФА и ПЦР, интерпретация результатов диагностики может быть следующая:

Если пациенту проведено развернутое исследование, тогда результаты могут быть такими:

Только специалист может правильно трактовать результаты лабораторных анализов. Постановка диагноза основывается на комплексной оценке клинической симптоматики, данных инструментальных обследований, ИФА и ПЦР.

При получении ложно+/- результатов требуется повторная сдача крови. Обязательно анализ проводится в конце лечения, что нужно для подтверждения выздоровления.

Неотъемлемой частью диагностики является УЗИ, которое позволяет оценить размеры, структуру и очертания печени и других внутренних органов.

Для более тщательного анализа требуется биопсия. Она проводится под анестезией, после чего материал направляется на гистологическое исследование.

Путем регулярной проверки крови пациента специалисту удается отследить динамику изменений, судить о степени повреждения печени, активности возбудителя и эффективности проводимой терапии.